เบนโซไพรีนอยู่ในกลุ่มโพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน - PAHs นี่คือกลุ่มของสารประกอบอินทรีย์ในโครงสร้างทางเคมีซึ่งมีวงแหวนเบนซีน - กลุ่มสามวงขึ้นไป คำจำกัดความทางเคมีของ benzapyrene: สารอินทรีย์ที่มีคาร์บอนซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของกลุ่มโพลีไซคลิกไฮโดรคาร์บอนที่มีมวลต่อโมลาร์ 252.31 g / mol

เบนซาไพรีนคืออะไร

Benzopyrene เช่นเดียวกับ PAHs ส่วนใหญ่เป็นผลมาจากความก้าวหน้าทางเทคโนโลยีซึ่งเป็นผลมาจากกิจกรรมของมนุษย์ แหล่งที่มาหลักของมลพิษทางเทคโนโลยีของ PAHs คือการเผาไหม้สารอินทรีย์ที่เป็นของแข็งและของเหลว รวมถึงผลิตภัณฑ์น้ำมันและน้ำมัน ไม้ และของเสียจากมนุษย์ จากแหล่งเบนซาไพรีนตามธรรมชาตินั้นควรค่าแก่การสังเกตไฟป่าภูเขาไฟระเบิด

อย่างไรก็ตามการก่อตัวของเบนซาไพรีนยังสามารถเกิดขึ้นได้โดยไม่ต้องใช้กระบวนการเผาไหม้ - ระหว่างไพโรไลซิส, การระอุ, การเกิดพอลิเมอไรเซชัน

Benzapyrene ถูกปล่อยออกมาในระหว่างการสูบบุหรี่: เนื้อหาของ benzapyrene ในควันบุหรี่หนึ่งมวนมีค่าเฉลี่ย 0.025 mcg ซึ่งสูงกว่า MPC หลายเท่า (เฉลี่ย 10,000-15,000 เท่า) มีการคำนวณว่าการสูบบุหรี่หนึ่งมวนนั้นเทียบเท่ากับการสูดดมก๊าซไอเสียเป็นเวลาสิบหกชั่วโมงในแง่ของปริมาณเบนซาไพรีน

สูตรเบนโซไพรีน

เบนซาไพรีนมีสองไอโซเมอร์ อย่างแรกคือ 1,2-benzapyrene (3,4-benzpyrene) - ที่มีอยู่ในผลิตภัณฑ์การเผาไหม้ทั้งหมด - น้ำมัน, น้ำมันดิน, ถ่านหิน, ควันจากแหล่งกำเนิดต่างๆรวมถึง ในรูปแบบที่บริสุทธิ์ สิ่งเหล่านี้คือผลึกรูปเข็มหรือแผ่นสีเหลืองอ่อน โดยมีจุดหลอมเหลวประมาณ 177 ° C

4,5-Benzopyrene - ผลึกในรูปของเข็มและจานสีเหลืองอ่อนที่มีจุดหลอมเหลว 179 ° C มีอยู่ในน้ำมันถ่านหินที่พบในดิน (โดยเฉพาะบริเวณใกล้สถานประกอบการและทางหลวง) ไม่มีคุณสมบัติในการกลายพันธุ์หรือเป็นสารก่อมะเร็ง

สูตรทางเคมีของเบนโซไพรีนคือ C20H12

เบนโซไพรีนในดินและอากาศ

เบนโซไพรีนแทบไม่เกิดขึ้นในสภาวะอิสระ แต่จะตกตะกอนในอนุภาคที่อยู่ในอากาศเสมอ เมื่อรวมกับมวลอากาศที่เคลื่อนที่ เบนซาไพรีนจะกระจายไปทั่วพื้นที่ขนาดใหญ่ และตกลงมาจากอากาศพร้อมกับอนุภาคที่เป็นของแข็ง (เช่น ในระหว่างการตกตะกอน) เข้าสู่ชั้นดิน อ่างเก็บน้ำ และบนพื้นผิวของอาคาร

ในการอพยพและการสะสมของเบนซาไพรีน แหล่งที่มาของการขนส่งทางถนนก็มีบทบาทเช่นกัน ด้านหนึ่ง การเคลื่อนที่ในระยะทางไกล รถยนต์มีส่วนทำให้เบนซาไพรีนกระจายอย่างสม่ำเสมอ ในทางตรงกันข้าม benzapyrene ที่ตกตะกอนใน ปริมาณมากสะสมตามทางหลวงและบนวัตถุที่อยู่ติดกัน (เรียกว่า "แหล่งทุติยภูมิ")

เบนโซไพรีน "รวม" ได้ง่ายในวัฏจักรของสารในธรรมชาติ: ด้วยการตกตะกอนซึ่งมักจะมีอนุภาคที่เป็นของแข็ง มันถูกพาไปยังดินแดนที่ห่างไกลจากแหล่งหลักของ PAHs เข้าสู่แหล่งน้ำจากที่ซึ่งในระหว่างกระบวนการระเหยมันจะเพิ่มขึ้น อีกครั้งในอากาศ ความสามารถในการโยกย้ายนี้ทำให้เบนซาไพรีนนำไปสู่ความจริงที่ว่าเนื้อหาสามารถสูงได้ในสถานที่ที่ไม่มีแหล่งที่มีประสิทธิภาพของสารนี้

เมื่อเข้าไปในสิ่งแวดล้อมและสะสมอยู่ในนั้น benzapyrene แทรกซึมเข้าไปในพืชซึ่งต่อมาทำหน้าที่เป็นอาหารปศุสัตว์หรือใช้ในโภชนาการของมนุษย์ ความเข้มข้นของเบนซาไพรีนในพืชสูงกว่าปริมาณในดิน และในอาหาร (หรืออาหารสัตว์) จะสูงกว่าในวัตถุดิบสำหรับการผลิต ผลของการเพิ่มความเข้มข้นของสารเคมี รวมทั้งเบนซาไพรีน เรียกว่าการสะสมทางชีวภาพ

ดังนั้น benzapyrene จึงเป็นอันตรายไม่เพียงแต่เป็นมลภาวะต่อสิ่งแวดล้อมเท่านั้น แต่ยังเป็นสารที่แทรกซึมเข้าสู่ร่างกายผ่านห่วงโซ่อาหารด้วย

MAC ของเบนซาไพรีน

วิธีการหลักในการกำหนดและควบคุมเบนซาไพรีนคือโครมาโตกราฟีของเหลว

ตามมาตรฐานด้านสุขอนามัย 2.1.6.695-98 และ 2.1.6.1338-03 ปริมาณเบนซาไพรีนในอากาศเฉลี่ยต่อวันสูงสุดที่อนุญาต (MPCds) คือ 0.1 ไมโครกรัม/100 ม.3 หรือ 10-9 ก./ลบ.ม. และ MPC ในดิน ตามมาตรฐานสุขอนามัย 2.1.72041-06 - 0.02 มก. / กก. โดยรวมโดยคำนึงถึงระดับพื้นหลัง ในอากาศในที่ทำงาน MPC กะเฉลี่ยไม่เกิน 0.00015 มก./ลบ.ม. (จากข้อ 1. และข้อ 2. GN 2.2.5. 1313-03)

MPC ของเบนซาไพรีนในน้ำไม่เกิน 0.000001 มก./ลิตร ในน้ำดื่มที่มีระบบจ่ายน้ำแบบรวมศูนย์ - ไม่เกิน 0.00005 มก./ลิตร ในน้ำดื่มบรรจุขวด - จากไม่เกิน 0.001 µg / l (น้ำ คุณภาพสูงสุด) ไม่เกิน 0.005 ไมโครกรัม/ลิตรในน้ำดื่มบรรจุขวดประเภทคุณภาพที่หนึ่ง

ในผลิตภัณฑ์อาหารที่มี benzapyrene ได้รับอนุญาตเนื่องจากคุณสมบัติทางเทคโนโลยี ระดับ benzapyrene ที่อนุญาตจะไม่เกิน 0.001 มก. / กก. ซึ่งรวมถึง: ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์จากผลพลอยได้ รวมทั้งผลิตภัณฑ์รมควัน น้ำมันหมูรมควัน; ไส้กรอกและผลิตภัณฑ์รมควันจากเนื้อสัตว์ปีกและเครื่องใน อาหารกระป๋องรมควันและแยมปลา, ปลารมควัน; อาหารเม็ด

เมื่อใช้สารแต่งกลิ่นรสที่มีควัน เนื้อหาของเบนซาไพรีนไม่เกิน 2 ไมโครกรัม/กิโลกรัม (ลิตร) และหลังจากใช้แล้ว ปริมาณเบนซาไพรีนในผลิตภัณฑ์สำเร็จรูปไม่ควรเกิน 0.03 ไมโครกรัม/กิโลกรัม (ลิตร)

ในผลิตภัณฑ์อาหารอื่นๆ ไม่อนุญาตให้มีเบนซาไพรีน

อย่างไรก็ตาม จากผลการตรวจสอบพบว่ามีปริมาณเบนซาไพรีนเกินบรรทัดฐานหลายครั้ง โดยเฉลี่ยแล้ว ระดับมลพิษทางอากาศในเมืองต่างๆ จะสูงกว่า MPC 5-12 เท่า ในดิน - 3-7 เท่า ในอาหาร - จาก 1.5 ถึง 11 เท่า

ผลของเบนซาไพรีนต่อร่างกายมนุษย์

เบนโซไพรีนจัดเป็นสารประเภทความเป็นอันตรายที่หนึ่ง ระดับความเป็นอันตรายที่หนึ่งคือสารที่มีผลกระทบต่อสิ่งแวดล้อมสูงมาก ในขณะที่การเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากสิ่งเหล่านี้จะย้อนกลับไม่ได้และไม่สามารถกู้คืนได้

เบนโซไพรีนเป็นหนึ่งในสารก่อมะเร็งที่ทรงพลังที่สุดแต่ยังแพร่หลายอยู่ มีความคงตัวทางเคมีและทางความร้อน ซึ่งมีคุณสมบัติในการสะสมทางชีวภาพ เมื่อเข้าสู่ร่างกายและสะสมในร่างกายแล้ว มันจะทำหน้าที่อย่างต่อเนื่องและทรงพลัง นอกจากจะเป็นสารก่อมะเร็งแล้ว benzapyrene ยังมีผลต่อการกลายพันธุ์ พิษต่อตัวอ่อน และโลหิตเป็นพิษ

เส้นทางการแทรกซึมของเบนซาไพรีนเข้าสู่ร่างกายมีหลากหลาย: ด้วยอาหารและน้ำ ทางผิวหนัง และโดยการสูดดม ระดับของอันตรายไม่ว่าเบนซาไพรีนจะเข้าสู่ร่างกายอย่างไร ในการทดลอง เช่นเดียวกับการติดตามตรวจสอบพื้นที่ที่ไม่เอื้ออำนวยต่อระบบนิเวศน์ เบนซาไพรีนถูกนำเข้าสู่ดีเอ็นเอเชิงซ้อน ทำให้เกิดการกลายพันธุ์ที่ไม่สามารถย้อนกลับได้และส่งต่อไปยังรุ่นต่อๆ ไป สิ่งที่น่ากังวลเป็นพิเศษคือข้อเท็จจริงของการสะสมทางชีวภาพของเบนซาไพรีน: โอกาสในการพัฒนาการกลายพันธุ์ในลูกหลานรุ่นต่อไปจะเพิ่มขึ้นหลายเท่าเนื่องจากการสะสมทางชีวภาพ

ต้องการเลิกสูบบุหรี่หรือไม่?

แล้วมาร่วมวิ่งมาราธอนเลิกบุหรี่กับเรา
จะทำให้การเลิกบุหรี่ง่ายขึ้นมาก

หนังสือรับรองเลขที่ 30-08 ลงวันที่ 03/04/2551
FR.1.31.2008.01033

1. วัตถุประสงค์ของการศึกษา

ขั้นตอนการวัดนี้ใช้กับเนื้อรมควัน ปลารมควัน และผลิตภัณฑ์ที่มีไขมัน และกำหนดความเข้มข้นมวลของเบนโซ (เอ)ไพรีนโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพร้อมการตรวจจับฟลูออไรเมตริก

2. ช่วงการวัด

MPC for benz(a)pyrene ในไขมัน เนื้อรมควัน ผลิตภัณฑ์ปลารมควัน คือ 1 ไมโครกรัม/กก.

วิธีการนี้ให้ผลลัพธ์ของการวัดความเข้มข้นมวลของเบนโซ (เอ)ไพรีนในช่วงที่แสดงในตารางที่ 1

ตารางที่ 1. ช่วงการวัดความเข้มข้นของมวลเบนโซ (a) pyrene

ประเภทสินค้า	ช่วงมวล ความเข้มข้น mcg/kg	กนง. ไมโครกรัม/กก.
ผลิตภัณฑ์ไขมัน	0,5 – 2,0	1,0
ผลิตภัณฑ์เนื้อรมควัน	0,5 – 2,0	1,0
ผลิตภัณฑ์ปลารมควัน	0,5 – 2,0	1,0

3. การเตรียมตัวอย่าง

การสุ่มตัวอย่าง การอนุรักษ์ และการจัดเก็บตัวอย่างผลิตภัณฑ์ดำเนินการตาม GOST 7631, GOST 9792, TU และเอกสารกำกับดูแลอื่นๆ ที่ควบคุมการสุ่มตัวอย่างสำหรับผลิตภัณฑ์บางประเภท

การเตรียมตัวอย่างประกอบด้วยขั้นตอนของการสุ่มตัวอย่าง (ตัวอย่างถูกทำให้เย็นล่วงหน้าที่อุณหภูมิลบ 12-18 °C เป็นเวลา 30 นาที) การบด การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยโซเดียมซัลเฟตปราศจากน้ำ การสกัดตัวอย่างที่ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยเฮกเซนในขวดโดยใช้ อ่างอัลตราโซนิก, การตกตะกอนที่เกิดขึ้นเองตามธรรมชาติของตะกอนที่เป็นของแข็ง (ใน 1-2 นาที), การล้างไขมันสารสกัดในช่องแช่แข็ง (เติมซิลิกาเจลในปริมาณที่ชั่งน้ำหนักลงในกระบอกสูบ, สารสกัดจะถูกเพิ่ม, เนื้อหาของกระบอกสูบจะถูกวางใน ช่องแช่แข็ง) การทำความสะอาดชั้นเฮกเซนเหนือตะกอนด้วยการสกัดแบบโซลิดเฟสแบบไม่กักเก็บ (บนตลับ Strata Silica Si–1)* การเป่าสารชะในกระแสอากาศหรือก๊าซเฉื่อย

* บันทึก. เมื่อความเข้มข้นของไขมันของผลิตภัณฑ์ที่วิเคราะห์ดั้งเดิมน้อยกว่า 5% จะต้องเติมน้ำยาสำหรับชะ - เอทิลอะซิเตต (สารสกัดบริสุทธิ์ 0.1 มล. ถึง 6 มล.) จำนวนเล็กน้อยลงในสารสกัดตัวอย่างดั้งเดิมหลังจากการแช่แข็ง

4. ดำเนินการวิเคราะห์โครมาโตกราฟี

4.1. อุปกรณ์และเงื่อนไขสำหรับการวิเคราะห์ HPLC ของสารละลายสำหรับสอบเทียบ benz(a)pyrene, ตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่เตรียมไว้

สำหรับการวิเคราะห์โครมาโตกราฟีของเบนโซ (เอ)ไพรีน จำเป็นต้องใช้ระบบโครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงแบบไอโซเครติกพร้อมการตรวจจับฟลูออไรเมตริก

ในการดำเนินการวิเคราะห์ ให้เตรียมสารละลายสอบเทียบเบื้องต้นจาก GRM ของสารละลายเบนโซ(a)ไพรีนในเฮกเซน หรือจากค่ากลั่นของสารละลายเบนโซ(เอ)ไพรีนในอะซิโตไนไทรล์ (ตัวทำละลายถูกเป่าออก ตัวอย่างมาตรฐานคือ ละลายอีกครั้งในเฮกเซน); ดำเนินการเตรียมตัวอย่าง เตรียมอุปกรณ์สำหรับการใช้งาน

อุปกรณ์:

โครมาโตกราฟีของเหลว "Stayer" พร้อมเครื่องตรวจจับฟลูออไรด์

คอมพิวเตอร์ส่วนบุคคลที่ติดตั้งซอฟต์แวร์ "MultiChrome สำหรับ Windows XP" เวอร์ชัน 1.5 หรือ 2x

โหมดไอโซเครติก;

คอลัมน์: Luna C18(2) 150x3.0 mm 3 µm (Phenomenex, USA);

เสาป้องกัน: C18 4x3.0 มม. (Phenomenex, USA);

เฟสเคลื่อนที่: สารละลายอะซิโตไนไทรล์/น้ำ (75:25);

อัตราการไหล: 0.3 มล./นาที;

ปริมาณลูป: 10 ไมโครลิตร;

อุณหภูมิ: 50 องศาเซลเซียส;

ช่วง RFU: 0.01;

การตรวจจับ: ฟลูออไรเมตริก (λex: 365±2 nm; λem: 400-460 nm)

การสอบเทียบดำเนินการโดยใช้สารละลายสอบเทียบ (ตลอดช่วงความเข้มข้นที่กำหนดทั้งหมด) อย่างน้อยหนึ่งครั้งทุกสองสัปดาห์ เช่นเดียวกับเมื่อใช้รีเอเจนต์ชุดใหม่ การเปลี่ยนคอลัมน์ และหลังการซ่อมแซมโครมาโตกราฟี

4.2. การหาปริมาณสารเบนโซ (เอ)ไพรีนในตัวอย่างผลิตภัณฑ์

ในการพิจารณาเนื้อหาเชิงปริมาณของส่วนประกอบตัวอย่างผลิตภัณฑ์ (benzo(a)pyrene) จะทำการวิเคราะห์ด้วยโครมาโตกราฟีของหนึ่งในสารละลายสำหรับการสอบเทียบ ตามด้วยการวิเคราะห์ด้วยโครมาโตกราฟีของตัวอย่างที่เตรียมไว้ เพื่อความน่าเชื่อถือของการวัด การวิเคราะห์ด้วยโครมาโตกราฟีของทั้งสารละลายสอบเทียบและตัวอย่างที่เตรียมไว้จะดำเนินการอย่างน้อย 2 ครั้งติดต่อกัน

การใช้ซอฟต์แวร์ที่ติดตั้ง - "MultiChrome สำหรับ Windows XP" ในรายงานหรือสูงกว่าจุดสูงสุด (ขึ้นอยู่กับการตั้งค่าของตัวเลือก "VIEW") เมื่อสิ้นสุดการวัด ผลลัพธ์จะถูกกำหนดโดยอัตโนมัติในรูปแบบของความเข้มข้นใน ตัวอย่างที่นำมาใช้ในโครมาโตกราฟี (แต่ไม่ใช่ในตัวอย่างแรกเริ่มที่ทำการวิจัย!)

เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ จำเป็นต้องทำการวัดแบบขนานอย่างน้อยสองครั้ง (รับสองโครมาโตแกรม) ผลการวัดจะใช้เป็นค่าเฉลี่ยเลขคณิตของปริมาณเบนโซ(a)ไพรีนในความเข้มข้นของตัวอย่างที่วิเคราะห์ C xp, ไมโครกรัม/ลิตร (คำนวณจากสองค่าของความเข้มข้นมวลของเบนโซ(a)ไพรีนใน ความเข้มข้นของตัวอย่างที่วิเคราะห์ C 1 และ C 2)
เศษส่วนมวลของเบนโซ(a)ไพรีนในตัวอย่างที่วิเคราะห์แล้ว (ในตัวอย่างเดิม) X, mcg/kg คำนวณโดยสูตร:

ที่ไหน:
C xp - ค่าเฉลี่ยของความเข้มข้นของเบนโซ (เอ)ไพรีน ที่ได้จากโครมาโตกราฟีในการวัดแบบขนานสองครั้ง [ng/ml]
วี 1 – ปริมาตรของสารสกัดเริ่มต้น ซึ่งจริง ๆ แล้วเท่ากับปริมาตรของเฮกเซนที่ใช้สำหรับการสกัดขั้นต้น (50 มล.)
วี 2 - ปริมาตรของสารสกัด (ส่วนหนึ่งของต้นฉบับ) ที่นำไปแช่แข็ง (30 มล.)
วี 3 คือปริมาตรของสารสกัด (ส่วนหนึ่งของสารสกัดหลังจากการแช่แข็ง) ที่ถ่ายสำหรับ SPE (6 มล.) [มล.]
วี 5 คือปริมาตรของสารสกัดสุดท้ายซึ่งส่วนหนึ่งถูกนำเข้าสู่โครมาโตกราฟี (ประมาณ 3 มล.) [มล.];
K สุ่มตัวอย่าง - สัมประสิทธิ์การสุ่มตัวอย่าง โดยคำนึงถึงสัดส่วนของมวลของผลิตภัณฑ์ตัวอย่าง (ผสมกับโซเดียมซัลเฟต) ที่นำมาสกัด ของมวลรวมของกลุ่มตัวอย่างที่นำมาวิเคราะห์ ในทุกกรณีจะเท่ากับ 0.736;
เค เยือกแข็ง คือ สัมประสิทธิ์การสูญเสียของเบนโซ(เอ)ไพรีนในระหว่างการเยือกแข็ง สำหรับผลิตภัณฑ์ที่ทำการศึกษาทุกประเภท ค่าสัมประสิทธิ์นี้จะเท่ากันและเท่ากับ 0.95
เค เอ็กซ์ตร้า 1 คือสัมประสิทธิ์การสกัดของเหลวเบื้องต้นด้วยเฮกเซน สำหรับผลิตภัณฑ์ทุกประเภทที่อยู่ระหว่างการศึกษาจะเท่ากันและเท่ากับ 0.95;
K TFextr.2– สัมประสิทธิ์การสกัดด้วยเฟสของแข็งของเบนโซ(เอ)ไพรีน เท่ากับ 0.95
ม. – ดินหรือดินที่นำมาวิเคราะห์ [g]

โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน: คุณสมบัติทางเคมีกายภาพและผลกระทบทางชีวภาพ ทบทวนวิธีการกำหนดเบนซาไพรีน การหาค่าเบนซาไพรีนในน้ำโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพร้อมการตรวจจับด้วยฟลูออเรสเซนต์

ส่งงานที่ดีของคุณในฐานความรู้เป็นเรื่องง่าย ใช้แบบฟอร์มด้านล่าง

นักศึกษา นักศึกษาระดับบัณฑิตศึกษา นักวิทยาศาสตร์รุ่นเยาว์ที่ใช้ฐานความรู้ในการศึกษาและการทำงานจะขอบคุณเป็นอย่างยิ่ง

โพสต์เมื่อ http://www.allbest.ru/

หลักสูตรนี้ประกอบด้วย 30 หน้า 1 ส่วน 4 ส่วนย่อย 14 ย่อหน้า 6 ตารางและ 9 ตัวเลข ในตอนท้ายของหลักสูตรจะมีรายการอ้างอิงซึ่งประกอบด้วย 14 ข้อ

วัตถุประสงค์ของการวิจัยคือเบนโซ (เอ)ไพรีน คุณสมบัติของสาร ฤทธิ์ก่อมะเร็ง รวมถึงวิธีการในการพิจารณา หลักสูตรนี้นำเสนอวิธีการต่างๆ เช่น แก๊สโครมาโตกราฟีด้วยการตรวจจับแมสสเปกโตรสโกปีและโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพร้อมการตรวจจับการเรืองแสง นอกจากนี้ เครื่องตรวจจับได้รับการพิจารณาว่าเหมาะสมสำหรับการบันทึกสัญญาณวิเคราะห์ของเบนโซ (เอ)ไพรีน และมีการพิสูจน์ความสมเหตุสมผลของการใช้เครื่องตรวจจับหนึ่งหรืออีกเครื่องหนึ่ง

นอกจากนี้ ในหลักสูตรยังมีการนำเสนอวิธีการตรวจวัดเบนโซ (เอ)ไพรีนในน้ำ ซึ่งประกอบด้วยการเตรียมตัวอย่าง การสอบเทียบโครมาโตกราฟี การวิเคราะห์ และการบันทึกข้อมูล กระดาษนำเสนอโครมาโตแกรมที่ได้จากวิธีการเหล่านี้

คำสำคัญ: โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน, เบนโซ(A)ไพรีน, โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง, โครมาโตกราฟีของแก๊ส, การตรวจจับฟลูออเรสเซนต์

งานหลักสูตร Tazi รวม 30 หน้า 1 ส่วน 4 ส่วนย่อย 14 คะแนน 6 masi และ 9 ตัวเลข ที่ขอบของงานเขียนเรียงความมีรายชื่อวรรณกรรมเริ่มต้นจากจุดที่ 14

Celta ในการศึกษาของฉันเกี่ยวกับเบนโซ (a) pyrene คุณสมบัติเชิงลบ ผลการก่อมะเร็ง และวิธีการอย่างใดสำหรับมัน ไม่ได้ถูกกำหนดไว้ หลักสูตรการทำงานรวมถึงวิธีการต่างๆ เช่น แก๊สโครมาโตกราฟีที่มีเส้นโค้งมวลสารและโครมาโตกราฟีประสิทธิภาพสูงพร้อมเส้นโค้งเรืองแสง นี่คือสิ่งที่จะพิจารณาว่าเป็นเครื่องตรวจจับ ซึ่งเหมาะสำหรับการรับสัญญาณเชิงวิเคราะห์จากเบนโซ (เอ)ไพรีนและการใช้งานที่เหมาะสมกับเครื่องตรวจจับ

โดยพื้นฐานแล้ว ในการทำงานเกี่ยวกับแอ่งน้ำ เรานำเสนอวิธีการตรวจวัด benz (a) pyrene ในน้ำ ซึ่งประกอบด้วยการเตรียมตัวอย่าง การสอบเทียบบนโครมาโตกราฟี การวิเคราะห์และการบันทึกข้อมูล กฎบัตรนำเสนอข้อมูลโดยได้รับตามวิธีการ

แนวคิดหลัก: POLYCYCLIC AROMATIC WATER, Benz (A) PYRENE, TECHNA CHROMATOGRAPHY ที่มีประสิทธิภาพสูง, โครมาโตกราฟีของแก๊ส, การเปิดเรืองแสง

หลักสูตรนี้กำหนดให้ครอบคลุม 30 ด้าน 1 แยก 4 โฟลเดอร์ย่อย 14 คะแนน 6 ตารางและ 9 ภาพวาด เมื่อจบหลักสูตร รายชื่อวรรณกรรม ซึ่งประกอบด้วย 14 คะแนน

เกี่ยวกับข้อเท็จจริงของการวิจัยของฉันเกี่ยวกับ benz (a) pyrene พลังของมัน การก่อมะเร็ง และวิธีการระบุ เครื่องตรวจจับที่เหมาะสำหรับการลงทะเบียนสัญญาณวิเคราะห์ไปยัง benzo (a) pyrene และความสมเหตุสมผลของเครื่องตรวจจับอื่นคือ พิสูจน์ได้

นอกจากนี้ ในงานของหลักสูตร จะนำเสนอวิธีการกำหนดเบนโซ (เอ)ไพรีนในน้ำ ซึ่งประกอบด้วยการเตรียมตัวอย่าง การจบโครมาโตกราฟี การวิเคราะห์และการลงทะเบียนข้อมูล หุ่นยนต์จะแสดงด้วยโครมาโตแกรมซึ่งนำมาจากวิธีการเหล่านี้

คำสำคัญ: POLICYCLIC AROMATIC CARBOHYDRATES, Benz(A)PYRENE, RIDINNA CHROMATOGRAPHY ประสิทธิภาพสูง, GAS CHROMATOGRAPHY, การตรวจจับการเรืองแสง

สัญลักษณ์

การแนะนำ

1. การทบทวนวรรณกรรม

1.1.1 ข้อมูลทั่วไป

1.1.2 ที่มาของ PAHs

1.1.4 การกระทำทางชีวภาพ

1.1.5 เบนซ์(เอ)ไพรีน ข้อมูลทั่วไป

1.2 วิธีการกำหนดเบนซาไพรีน

1.2.1 แก๊สโครมาโตกราฟี

1.3 การหาค่าเบนซาไพรีนในน้ำโดย HPLC

1.3.2 การเตรียมตัวอย่าง

1.3.3 จบการศึกษา

1.3.4 ดำเนินการวิเคราะห์ HPLC

1.3.5 การบันทึกและประมวลผลข้อมูล

1.4.2 การหาปริมาณของ BP

บรรณานุกรม

สัญลักษณ์

PAHs - โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน

BP - เบนโซ (a) pyrene

MPC - ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาต

MPC SS - ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาตเฉลี่ยรายวัน

HPLC - โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง

GC - แก๊สโครมาโตกราฟี

LC - โครมาโตกราฟีของเหลว

NPC - โครมาโตกราฟีเฟสปกติ

RPCH - โครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับ

LLE - การสกัดของเหลวและของเหลว

OFS - ตัวดูดซับแบบย้อนกลับ

TLC - โครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง

การแนะนำ

โพลีไซคลิก อะโรมาติก ไฮโดรคาร์บอน (PAHs) อยู่ในกลุ่มของสารมลพิษอินทรีย์ที่คงอยู่ พวกเขามีคุณสมบัติในการก่อมะเร็งที่เด่นชัด หนึ่งในตัวแทนที่อันตรายที่สุดของ PAHs คือ benzo(a)pyrene (BP)

Benz (a) pyrene ถูกค้นพบในปี 1933 ต่อมาในปี 1935 มีการศึกษาเพื่อยืนยันการก่อมะเร็ง วันนี้ benzo(a)pyrene จัดเป็นสารก่อมะเร็งในระดับอันตรายที่ 1 มีคุณสมบัติในการกลายพันธุ์ แม้แต่ความเข้มข้นเล็กน้อยของความดันโลหิตก็ส่งผลเสียต่อร่างกายมนุษย์ ความเข้มข้นของ BP ในอากาศเกินความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาต (MAC) เมื่อได้รับสารเป็นเวลานานอาจทำให้เกิดมะเร็งปอดได้ ดังนั้นปัญหาในการตรวจจับและคำจำกัดความจึงรุนแรง จากคุณสมบัติทางเคมีกายภาพของมัน ได้มีการพัฒนาวิธีการที่คล้ายกันจำนวนหนึ่งสำหรับการวิเคราะห์ โดยมีความแตกต่างกันเฉพาะในขั้นตอนของการสุ่มตัวอย่างและการเตรียมตัวอย่าง วัตถุประสงค์ของงานของฉันคือเพื่อทำความคุ้นเคยกับคุณสมบัติของ PAHs และ BP เพื่อศึกษาวิธีการแยก PAHs และวิธีการกำหนด BP

1. การทบทวนวรรณกรรม

1.1 โพลีไซคลิก อะโรมาติก ไฮโดรคาร์บอน (PAHs)

1.1.1 ข้อมูลทั่วไป

PAHs เป็นสารประกอบอินทรีย์โมเลกุลสูงในซีรีส์เบนซีน ซึ่งมีตัวแทนมากกว่า 200 ราย ประกอบด้วยวงแหวนเบนซิน 2 ถึง 7 วง PAHs มีการกระจายอย่างกว้างขวางในธรรมชาติและมีเสถียรภาพเมื่อเวลาผ่านไป พวกมันมีฤทธิ์ก่อมะเร็งและก่อให้เกิดการกลายพันธุ์ เนื่องจากความเป็นพิษและคุณสมบัติในการก่อมะเร็ง จึงจัดเป็นสารก่อมลพิษที่มีลำดับความสำคัญสูง การกำหนด PAHs ใช้ในการศึกษาทางนิเวศวิทยาและธรณีเคมี สารพิษที่เป็นพิษมากที่สุดคือ 3, 4-benz(a)pyrene และ 1, 12-benzperylene ซึ่งมักถูกกำหนดโดยเฉพาะอย่างยิ่งในวัตถุสิ่งแวดล้อม

1.1.2 ที่มาของ PAHs

PAHs เป็นผลพลอยได้จากการเผาไหม้เชื้อเพลิงฟอสซิลที่ไม่พึงประสงค์ เกิดขึ้นตามธรรมชาติเนื่องจากกระบวนการทางชีวภาพ PAHs หลายพันตันที่ปล่อยออกมาจากส่วนประกอบฮิวมิกของดินเข้าสู่ชีวมณฑลทุกปี แต่สารก่อมะเร็งเหล่านี้ส่วนใหญ่มาจากกระบวนการที่มนุษย์สร้างขึ้น

ถ่านหินถือเป็นส่วนผสมของนิวเคลียสของเบนซีนอะโรมาติกที่ควบแน่นจำนวนมากซึ่งมีปริมาณไฮโดรเจนน้อยที่สุด เมื่อสารเหล่านี้ถูกเผาในเตาเผา โรงไฟฟ้า เครื่องยนต์สันดาปภายใน สารประกอบเหล่านี้จะสลายตัว ที่ อุณหภูมิต่ำการเผาไหม้และการจัดหาออกซิเจนในบรรยากาศไม่เพียงพออะเซทิลีนที่ทำปฏิกิริยาและอะลิฟาติกไฮโดรคาร์บอน อะเซทิลีนจะรวมตัวเป็นบิวทาไดอีน ซึ่งจะสร้างนิวเคลียสของอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน เมื่อเติมเข้าไปในนิวเคลียสอะโรมาติกที่มีอยู่แล้ว PAHs จะถูกสร้างขึ้น

การเผาไหม้ที่ไม่สมบูรณ์ทำให้เกิดอนุภาคของเขม่าคาร์บอน PAHs ถูกดูดซับบนพื้นผิวและเข้าสู่สิ่งแวดล้อม

1.1.3 คุณสมบัติทางกายภาพและเคมีของ PAHs

PAHs ส่วนใหญ่เป็นสารประกอบผลึก (ยกเว้นอนุพันธ์แนฟทาลีนบางชนิด) ที่มีจุดหลอมเหลวสูง PAHs ละลายได้ไม่ดีในน้ำ เมื่อเปลี่ยนไปใช้ตัวทำละลายอินทรีย์ ความสามารถในการละลายจะเพิ่มขึ้นและขึ้นอยู่กับน้ำหนักโมเลกุลของตัวทำละลาย ตามกฎแล้วด้วยการเพิ่มจำนวนของวงแหวนอะโรมาติกและอนุมูลอัลคิลความสามารถในการละลายของ PAHs จะลดลง

PAHs ส่วนใหญ่ดูดซับรังสียูวีอย่างเข้มข้น (300–420 นาโนเมตร) และโฟโตออกซิไดซ์อย่างรวดเร็วในบรรยากาศเพื่อสร้างควิโนนและสารประกอบคาร์บอนิล

1.1.4 การกระทำทางชีวภาพ

PAHs เข้าสู่ร่างกายทางทางเดินหายใจ ผิวหนัง หรือทางเดินอาหาร

ประเภทของปฏิสัมพันธ์ของ PAHs กับร่างกายส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับตัวไฮโดรคาร์บอนเอง โดยพื้นฐานแล้ว เมื่อ PAHs เข้าสู่ร่างกาย เอ็นไซม์จะสร้างสารประกอบอีพ็อกซี่ที่ทำปฏิกิริยากับกวานีน ซึ่งขัดขวางการสังเคราะห์ดีเอ็นเอ ทำให้เกิดความผิดปกติ หรือนำไปสู่การกลายพันธุ์ที่นำไปสู่การพัฒนาของมะเร็ง

หนึ่งใน PAHs ที่เป็นพิษมากที่สุดดังที่ได้กล่าวไว้ก่อนหน้านี้คือ BP นอกจากนี้ ฤทธิ์ก่อมะเร็งของ PAHs อยู่ที่ 70-80% เนื่องจากอิทธิพลของความดันโลหิตตก ดังนั้นโดยการปรากฏตัวของ BP ใน ผลิตภัณฑ์อาหารการมีอยู่ของ PAHs อื่น ๆ สามารถตัดสินได้

1.1.5 เบนซ์(เอ)ไพรีน ลักษณะทั่วไป

Benz (a) pyrene (C 20 H 12) เป็นสารประกอบทางเคมีซึ่งเป็นตัวแทนของตระกูลโพลีไซคลิกไฮโดรคาร์บอน (รูปที่ 1.1) ซึ่งเป็นสารประเภทอันตรายที่หนึ่ง มันเกิดขึ้นระหว่างการเผาไหม้เชื้อเพลิงของเหลวไฮโดรคาร์บอนของแข็งและก๊าซ (ในระดับที่น้อยกว่าระหว่างการเผาไหม้เชื้อเพลิงก๊าซ)

รูปที่ 1.1 สูตรโครงสร้างของเบนโซ(เอ)ไพรีน

BP เป็นจานหรือเข็มสีเหลือง สามารถละลายได้สูงในตัวทำละลายที่ไม่มีขั้ว เช่น ในโทลูอีน เบนซีน ไซลีน สามารถละลายได้น้อยกว่าเล็กน้อยในตัวทำละลายขั้ว แต่ไม่ละลายในน้ำ

ความดันโลหิตสะสมส่วนใหญ่ในดิน น้อยกว่าในน้ำ จากดินเข้าสู่พืชโดยเคลื่อนที่ไปตามห่วงโซ่อาหาร ในแต่ละระดับถัดไป เนื้อหาของ benzo(a)pyrene จะเพิ่มขึ้นตามลำดับความสำคัญ

ความดันโลหิตเป็นสารเคมีก่อมะเร็งทั่วไปและเป็นอันตรายต่อมนุษย์แม้ในระดับความเข้มข้นที่น้อยที่สุด เนื่องจากมีคุณสมบัติในการสะสมในร่างกายมนุษย์ MPC ของเบนโซ (a) pyrene ในวัตถุต่าง ๆ แสดงไว้ในตารางที่ 1.1 นอกจากนี้ BP ยังมีคุณสมบัติในการกลายพันธุ์ กล่าวคือ มันสามารถทำให้เกิดการกลายพันธุ์

ตารางที่ 1.1 MPC ของเบนโซ (a) pyrene ในสภาพแวดล้อมต่างๆ

ชื่อวัตถุ	MAC, ไมโครกรัม/กก.
ผลิตภัณฑ์รมควัน
ซีเรียล
น้ำดื่ม
อ่างเก็บน้ำ

ในอากาศ ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาตเฉลี่ยต่อวัน (MPC CC) คือ 0.1 µg/100m 3

1.2 วิธีการหาเบนโซ(เอ)ไพรีน

วิธีการหลักในการกำหนด PAHs คือโครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงแบบย้อนกลับเฟส (HPLC) ที่มีการตรวจจับฟลูออไรเมตริกหรือสเปกโตรสโกปีและแก๊สโครมาโตกราฟี (GC) ที่มีการเลือกมวล การแตกตัวเป็นไอออนด้วยเปลวไฟ การดักจับอิเล็กตรอน หรือการตรวจจับโฟโตอิออไนเซชัน

ในการตรวจสอบ BP จะใช้วิธีการสเปกโตรสโกปีเรืองแสงตามเอฟเฟกต์ Shpolsky สาระสำคัญของผลกระทบอยู่ในความจริงที่ว่าที่อุณหภูมิต่ำโมเลกุล polyatomic บางตัวให้สเปกตรัมการเรืองแสงกึ่งเชิงเส้นที่มีความละเอียดสูง ข้อดีของวิธีนี้คือความต้องการระดับการทำให้บริสุทธิ์และความไวต่ำ แต่ความซับซ้อนของฮาร์ดแวร์นั้นเป็นข้อจำกัดที่สำคัญต่อคำจำกัดความของ BP

โครมาโตกราฟีเป็นวิธีการแยก วิเคราะห์ และศึกษาทางเคมีกายภาพของสารโดยพิจารณาจากการเคลื่อนที่ของโซนของสารตามชั้นตัวดูดซับในกระแสเฟสเคลื่อนที่ที่มีการดูดซับและการคายการดูดซับซ้ำหลายครั้ง การแยกตัวเกิดขึ้นเนื่องจากความแตกต่างในค่าคงที่การกระจายของสารแต่ละตัวระหว่างสองเฟส คุณลักษณะที่สำคัญที่สุดของโครมาโตกราฟีคือลักษณะไดนามิกของกระบวนการ ซึ่งการไล่ระดับสีเกิดขึ้นในการกระจายความเข้มข้นของโมเลกุลหรืออนุภาค

รูปแบบทั่วไปสำหรับการแยกส่วนประกอบของของผสมจะแสดงในรูปที่ 1.2

รูปที่ 1.2 แผนการดำเนินงานของกระบวนการโครมาโตกราฟี

ข้อดีของวิธีโครมาโตกราฟีรวมถึงความเป็นไปได้ของการใช้งานพร้อมกัน จำนวนมากพารามิเตอร์ที่แสดงลักษณะการแยก การระบุ การหาปริมาณของส่วนประกอบในส่วนผสม ดังนั้นโครมาโตกราฟีจึงเป็นแหล่งข้อมูลหลายช่องทาง

ขึ้นอยู่กับสถานะของการรวมตัวของเฟสเคลื่อนที่ วิธีโครมาโตกราฟีแบ่งออกเป็นโครมาโตกราฟีแบบแก๊สและของเหลว

ในทางกลับกันแก๊สโครมาโตกราฟีขึ้นอยู่กับสถานะของการรวมตัวของนิ่ง (นิ่ง) รวมถึงโครมาโตกราฟีแบบแก๊สของเหลวและแก๊ส - ของแข็ง - เฟส

โครมาโตกราฟีของเหลวแบ่งออกเป็นของเหลว-ของเหลว ของเหลว-ของแข็ง และของเหลว-เจล

1.2.1 แก๊สโครมาโตกราฟี

GC เป็นโครมาโตกราฟีชนิดหนึ่งซึ่งเฟสเคลื่อนที่อยู่ในสถานะก๊าซหรือไอระเหย - ก๊าซเฉื่อย เป็นก๊าซพาหะ เฟสที่อยู่กับที่คือของเหลวที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูง ซึ่งจับจ้องอยู่ที่ตัวพาที่มีรูพรุนหรือบนผนังของหลอดเส้นเลือดฝอยยาว

GC เป็นวิธีการสากลสำหรับการแยกส่วนผสมของสารที่ระเหยโดยไม่สลายตัว ส่วนประกอบของของผสมเคลื่อนผ่านคอลัมน์โครมาโตกราฟีด้วยก๊าซพาหะ ในกรณีนี้ ส่วนผสมจะถูกกระจายซ้ำๆ ระหว่างก๊าซพาหะกับเฟสที่อยู่กับที่ การแยกตัวเกิดขึ้นเนื่องจากความสามารถในการละลายที่แตกต่างกันของส่วนประกอบผสมในเฟสของแข็ง ที่ทางออกของสารจากคอลัมน์ สารเหล่านี้จะถูกบันทึกโดยใช้เครื่องตรวจจับ

เครื่องตรวจจับเป็นอุปกรณ์ต่อเนื่องที่ลงทะเบียนสัญญาณวิเคราะห์ มีการเสนอระบบตรวจจับประมาณ 60 ประเภทสำหรับ GC ตารางที่ 1.2 แสดงประเภทของตัวตรวจจับที่ใช้บ่อยที่สุดใน GC

ตาราง 1.2 เครื่องตรวจจับแก๊สโครมาโตกราฟี

ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
โดยการนำความร้อน	บันทึกความแตกต่างของค่าการนำความร้อนระหว่างสารที่วิเคราะห์และก๊าซพาหะ
ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
กริปไฟฟ้า	ดักจับโดยตัววิเคราะห์ของอิเล็กตรอนความร้อนที่เกิดจากการฉายรังสีด้วยอนุภาค β หรืออิเล็กตรอนพลังงานสูงของก๊าซพาหะ
ยูวี	การดูดซับแสงยูวีโดยโครโมฟอร์ที่วิเคราะห์จำเพาะ
ไมโครเวฟพลาสม่า	การกระตุ้นของสารที่วิเคราะห์ในพลาสมาไมโครเวฟและการเปล่งแสงที่ความยาวคลื่นลักษณะเฉพาะของธาตุที่มีอยู่ในสาร
โฟโตเมตริกเปลวไฟ	การกระตุ้นของสารที่วิเคราะห์ในเปลวไฟและการเปล่งแสงขึ้นอยู่กับชนิดขององค์ประกอบที่มีอยู่ในสาร
สเปกโตรมิเตอร์ดูดกลืนอะตอม	การทำให้เป็นละอองด้วยความร้อนตามด้วยการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นจำเพาะ
เคมีไฟฟ้า	การดูดซับสารที่วิเคราะห์โดยการไหลของของเหลวและการตรวจจับไฟฟ้าเคมีในการไหล
อินฟราเรดสเปกโตรมิเตอร์	การดูดซับแสงในบริเวณ IR โดยตัววิเคราะห์
เปลวไฟไอออไนซ์	การก่อตัวและการลงทะเบียนของไอออนในเปลวไฟระหว่างการเผาไหม้ของสารที่วิเคราะห์
แมสสเปกโตรมิเตอร์	การก่อตัวของโมเลกุลและชิ้นส่วนไอออนโดยผลกระทบของอิเล็กตรอนหรือไอออไนซ์ทางเคมี
photoionization	การเกิดโฟโตเคมีและการลงทะเบียนของไอออนภายใต้การกระทำของรังสี UV อย่างหนักบนสารวิเคราะห์

เครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์มีความละเอียดอ่อนแต่ไม่สามารถเลือก BP ได้ ดังนั้นจึงใช้สำหรับการวิเคราะห์สารผสมอย่างง่ายเท่านั้น

เครื่องตรวจจับการจับอิเล็กตรอนมีทั้งความไวและการคัดเลือกสำหรับ BP แต่การใช้งานทำได้ยากเนื่องจากมีการตอบสนองสูงต่อสารประกอบอิเล็กโตรฟิลลิก

การใช้โฟโตอิออไนเซชันมีแนวโน้มในการกำหนด BP แต่ไม่พบการกระจายอย่างกว้างขวางเนื่องจากความไม่เสถียรของการทำงานและต้นทุนของอุปกรณ์สูง

GC ที่มีการตรวจจับแมสสเปกโตรเมตรีเป็นทางออกที่ดีที่สุดสำหรับการตรวจวัดเบนซาไพรีนในสารผสมที่ซับซ้อน

หลักการทำงานของแมสสเปกโตรมิเตอร์คือการกระจายชิ้นส่วนหรือไอออนตามมวล กระบวนการไอออไนเซชันใช้เพื่อเปลี่ยนโมเลกุลที่เป็นกลางให้เป็นไอออน ผลกระทบของอิเล็กตรอนมักถูกใช้เพื่อทำให้สารประกอบอินทรีย์แตกตัวเป็นไอออน นอกจากนี้ยังใช้ไอออไนซ์ทางเคมีซึ่งขึ้นอยู่กับการเกิดปฏิกิริยาโมเลกุลไอออน ในการศึกษาโมเลกุลชีวภาพ โพลีเมอร์ และสารอื่นๆ ที่ไม่สามารถถ่ายโอนไปยังเฟสของแก๊สได้โดยไม่มีการสลายตัว จะใช้ไอออไนซ์ชนิดพิเศษ

GC ที่มีการตรวจจับด้วยแมสสเปกโตรสโกปีเป็นวิธีเดียวที่ช่วยให้สามารถใช้มาตรฐานภายในสำหรับการวัดเชิงปริมาณได้ ใช้สารผสมไอโซเมอร์ 2 H และ 13 C ที่ติดฉลากของ PAHs เป็นสารมาตรฐาน การเปลี่ยนน้ำหนักและข้อเท็จจริงที่ว่าสารอ้างอิงมีลักษณะเกือบเหมือนกับ PAHs ที่ไม่มีฉลากช่วยให้ระบุตัวตนได้ง่ายขึ้น

ข้อเสียเล็กน้อยประการหนึ่งของแมสสเปกโตรมิเตอร์คือช่วงเชิงเส้นเล็ก ๆ ของการตอบสนองของเครื่องตรวจจับ ดังนั้นแมสสเปกโตรมิเตอร์แบบเดิมจึงถูกแทนที่ด้วยเวลาของเที่ยวบิน คุณลักษณะของมันคือสำหรับ เวลาอันสั้นเป็นไปได้ที่จะได้สเปกตรัมมวลที่สมบูรณ์ของสารประกอบและการวัดมวลที่แม่นยำจนถึง 0.0001 น.

การผสมผสานระหว่างแมสสเปกโตรมิเตอร์ตามเวลาบินกับแก๊สโครมาโตกราฟีช่วยให้สามารถแยกส่วนประกอบที่ดีของสารผสมที่ซับซ้อนและขีดจำกัดการตรวจจับต่ำได้

1.2.2 โครมาโตกราฟีของเหลว

Liquid chromatography (LC) คือวิธีการสำหรับการแยกและวิเคราะห์สารที่ซับซ้อน ซึ่งของเหลวทำหน้าที่เป็นเฟสเคลื่อนที่ ในอีกด้านหนึ่ง เฟสเคลื่อนที่จะทำหน้าที่ขนส่ง กล่าวคือ ถ่ายโอนสารที่ไม่สามารถดูดซับได้ และในทางกลับกันควบคุมค่าคงที่สมดุลและเป็นผลให้คงอยู่อันเป็นผลมาจากการมีปฏิสัมพันธ์กับเฟสที่อยู่กับที่และกับโมเลกุลของสารที่ถูกแยกออก

ใน LC การแยกส่วนใหญ่มักเกิดขึ้นที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างที่วิเคราะห์แล้วจะถูกฉีดเข้าไปในคอลัมน์และผ่านสารชะ ใน LC ธรรมชาติของเฟสเคลื่อนที่เป็นสิ่งสำคัญ ด้วยเหตุนี้ การรวมกันของเฟสคงที่จำนวนน้อยและเฟสเคลื่อนที่จำนวนมากทำให้สามารถแก้ปัญหาการวิเคราะห์ต่างๆ ได้

การวิเคราะห์ในโครมาโตกราฟีของเหลวแบบคลาสสิกดำเนินการมาเป็นเวลานาน เนื่องจากอัตราการป้อนตัวอย่างต่ำ วิธีนี้เหมาะสำหรับการแยกส่วนประกอบเบื้องต้นของของผสม ในกรณีส่วนใหญ่ใช้ HPLC การถ่ายโอนมวลอย่างรวดเร็วพร้อมประสิทธิภาพการแยกสูงช่วยให้ HPLC สามารถกำหนดโมเลกุล โมเลกุลขนาดใหญ่ และไอออน ความแตกต่างระหว่าง LC แบบคลาสสิกและ HPLC แสดงไว้ในตาราง 1.3

ตารางที่ 1.3 ความแตกต่างในการทดลองระหว่าง LC . แบบคลาสสิกและประสิทธิภาพสูง

ลักษณะ	LC .คลาสสิก	HPLC
ความดัน atm	จากเศษส่วนของตู้เอทีเอ็ม สูงถึง 2 ตู้เอทีเอ็ม
อัตราการไหล mm/min
ระยะเวลาการแยก	จากหลายชั่วโมงเป็นหลายวัน	หลายนาทีถึงหลายชั่วโมง
อุปกรณ์	ลำโพงและอุปกรณ์เสริม	โครมาโตกราฟ
ประเภทการแยก	การเตรียมการแยกตัว	ฝ่ายวิเคราะห์
การตรวจจับ	การตรวจจับบุคคล เศษส่วนโดยวิธีวิเคราะห์	ด้วยเครื่องตรวจจับ
ปริมาณสารทดสอบ	จากไม่กี่ไมโครกรัมเป็นหลายกิโลกรัม	หลาย ng ถึง หลายไมโครกรัม

HPLC คือวิธีการโครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์ในที่ซึ่งเฟสเคลื่อนที่เป็นของเหลวที่เคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์โครมาโตกราฟีที่เต็มไปด้วยเฟสที่อยู่กับที่ (ตัวดูดซับ) คอลัมน์สำหรับ HPLC มีความต้านทานไฮดรอลิกสูงที่ทางเข้า

ขึ้นอยู่กับกลไกของการแยกสาร ตัวเลือก HPLC ต่อไปนี้มีความโดดเด่น:

ก) การกระจาย;

b) การแลกเปลี่ยนไอออน

ค) พิเศษ;

ง) ไครัล;

จ) การดูดซับ

โครมาโตกราฟีแบบแบ่งส่วนจะขึ้นอยู่กับการกระจายตัวของสารระหว่างของเหลวสองชนิดที่เข้ากันไม่ได้ คล้ายกับการสกัดซ้ำ เมื่อผ่านเฟสเคลื่อนที่ของของเหลว การแยกตัวเกิดขึ้นเนื่องจากความสามารถในการละลายที่แตกต่างกันของส่วนประกอบของของผสมในเฟสคงที่ของของเหลว

ในโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน โมเลกุลของส่วนผสมของสารที่แยกตัวออกจากสารละลายเป็นไอออนบวกและแอนไอออน จะถูกแยกออกเมื่อเคลื่อนที่ผ่านตัวดูดซับ เนื่องจากความแรงของปฏิกิริยาระหว่างไอออนที่ถูกกำหนดและกลุ่มไอออนของตัวดูดซับต่างกัน

ในโครมาโตกราฟีแบบแยกขนาด โมเลกุลของสารจะถูกแยกตามขนาดเนื่องจากความสามารถที่แตกต่างกันในการเจาะเข้าไปในรูพรุนของเฟสที่อยู่นิ่ง ในกรณีนี้ โมเลกุลที่ใหญ่ที่สุดที่สามารถเจาะเข้าไปในจำนวนรูพรุนขั้นต่ำของเฟสที่อยู่นิ่งจะเป็นกลุ่มแรกที่ออกจากคอลัมน์ และสารที่มีขนาดโมเลกุลเล็กจะเหลือตัวสุดท้าย

ในโครมาโตกราฟีแบบไครัล สารประกอบออกฤทธิ์ทางแสงถูกแยกออกเป็นอิแนนชิโอเมอร์แต่ละชนิด (ไอโซเมอร์กระจก)

ในโครมาโตกราฟีแบบดูดซับ สารจะถูกแยกออกจากกันเนื่องจากความสามารถที่แตกต่างกันในการดูดซับและขจัดออกจากพื้นผิวของตัวดูดซับที่มีพื้นผิวที่พัฒนาแล้ว

ขึ้นอยู่กับขั้วของเฟสเคลื่อนที่และเฟสนิ่ง โครมาโตกราฟีการดูดซับจะแบ่งออกเป็นโครมาโตกราฟีแบบเฟสปกติ (NPC) และโครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับ (RPC)

NPC ใช้ตัวดูดซับแบบมีขั้วและเฟสเคลื่อนที่แบบไม่มีขั้ว ในขณะที่ RPC ใช้ตัวดูดซับแบบไม่มีขั้วและเฟสเคลื่อนที่แบบมีขั้ว

แม้ว่าโครมาโตกราฟีของเหลวเป็นวิธีการแยกตัวอย่างออกเป็นส่วนประกอบ แต่โครมาโตกราฟีของเหลวที่ทันสมัยไม่เพียงแต่ประกอบด้วยระบบการแยกสารเท่านั้น แต่ยังรวมถึงระบบสำหรับการวัดปริมาณเนื้อหาของแต่ละส่วนประกอบด้วย เช่น ระบบตรวจจับ โครงร่างของโครมาโตกราฟีแสดงในรูปที่ 1.3

เบนซาไพรีนเหลวโครมาโตกราฟีไฮโดรคาร์บอน

รูปที่ 1.3 แผนผังของโครมาโตกราฟีของเหลว

1 - ปั๊มสำหรับจ่ายเฟสเคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์

2 - เครื่องจ่ายสำหรับใส่ตัวอย่างลงในคอลัมน์

3 - คอลัมน์คั่น

4 - เครื่องตรวจจับ - อุปกรณ์สำหรับรับสัญญาณวิเคราะห์

5 - ระบบประมวลผล - ตัวแปลงสัญญาณวิเคราะห์ให้อยู่ในรูปแบบที่สะดวกต่อการรับรู้ของมนุษย์

ในการลงทะเบียนสัญญาณวิเคราะห์ดังที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้จะใช้เครื่องตรวจจับ ใน LC พวกเขาใช้ วิธีต่างๆการตรวจจับ บางส่วนถูกกล่าวถึงในตารางที่ 1.4

ตารางที่ 1.4 เครื่องตรวจจับในโครมาโตกราฟีของเหลว

ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
สเปกโตรโฟโตเมตริก	ในระหว่างกระบวนการชะล้าง ความหนาแน่นเชิงแสงของตัวถูกวัดที่ความยาวคลื่นที่กำหนด
ฟลูออไรเมตริก	รังสีเรืองแสงของตัวดูดซับ
ชื่อของเครื่องตรวจจับ	หลักการทำงาน
การหักเหของแสง	การกำหนดความเข้มข้นของสารขึ้นอยู่กับดัชนีการหักเหของแสงที่แตกต่างจากดัชนีการหักเหของแสงของเฟสเคลื่อนที่
เครื่องตรวจจับแสงเลเซอร์แบบระเหย	หลักการทำงานขึ้นอยู่กับความแตกต่างของแรงดันไอของตัวทำละลายโครมาโตกราฟีที่ประกอบเป็นเฟสเคลื่อนที่และสารที่วิเคราะห์

ใน HPLC เครื่องตรวจจับฟลูออไรด์ใช้เพื่อกำหนดความดันโลหิต ซึ่งคัดเลือกโดยเทียบกับเบนซาไพรีนและมีความไวสูง หลักการทำงานของเครื่องตรวจจับดังกล่าวขึ้นอยู่กับการวัดการปล่อยแสงฟลูออเรสเซนต์ของแสงที่ดูดกลืน การวัดส่วนใหญ่ดำเนินการในพื้นที่ UV ที่ความยาวคลื่นของการดูดซับสูงสุดสำหรับกลุ่มของสารที่กำหนด ความยาวคลื่นของรังสีฟลูออเรสเซนต์จะมากกว่าความยาวคลื่นของแสงที่ถูกดูดกลืนเสมอ เนื่องจากการตรวจจับดำเนินการจากความเข้มข้นเป็นศูนย์ เครื่องตรวจจับฟลูออไรด์จึงมีความไวมากกว่าเครื่องตรวจจับการดูดกลืน

การรวมกันของ HPLC กับเครื่องตรวจจับมวลสารไม่ได้ถูกนำมาใช้ในการกำหนดหาเบนซาไพรีน นี่เป็นเพราะความจริงที่ว่ามีข้อกำหนดสูงเกี่ยวกับความบริสุทธิ์ของสารสกัดเช่น ระยะเวลาของการวิเคราะห์เพิ่มขึ้นเนื่องจากการเตรียมตัวอย่างอย่างลำบาก นอกจากนี้อุปกรณ์มีราคาค่อนข้างแพงและไม่คัดเลือกและมีความละเอียดอ่อนเพียงพอ

1.3 การหาปริมาณเบน (a) pyrene ในน้ำโดย HPLC

1.3.1 เครื่องมือวัด อุปกรณ์เสริม รีเอเจนต์

สำหรับการวัดจะใช้โครมาโตกราฟี Agilent 1200 HPLC (รูปที่ 1.4) กับเครื่องตรวจจับฟลูออไรด์ ซึ่งให้ช่วงความยาวคลื่นที่กระตุ้นในช่วง 270-365 นาโนเมตรและการลงทะเบียนเรืองแสงในช่วง 390-460 นาโนเมตร

รูปที่ 1.4 Agilent 1200 HPLC

คอลัมน์โครมาโตกราฟีเต็มไปด้วยตัวดูดซับสำหรับ OFC ภายใต้เงื่อนไขของการทดลอง ประสิทธิภาพของคอลัมน์ควรมีอย่างน้อย 5,000 แผ่นตามทฤษฎี

ในการเตรียมตัวอย่าง ให้ใช้กรวยแยกที่มีความจุ 2,000 ซม. 3 เครื่องระเหยแบบหมุน อ่างอาบน้ำ, ปั๊มฉีดน้ำ, เอ็น-เฮกเซน, โซเดียมคลอไรด์และซัลเฟต และอะซิโตไนไทรล์

ในการเตรียมสารละลายสำหรับการสอบเทียบ ให้ขวดที่มีความจุ 25 และ 50 ซม. 3 และปิเปตที่สำเร็จการศึกษาที่มีความจุ 1, 2, 5 ซม. 3, สารละลายเบนซ์ (a) ไพรีนที่มีความเข้มข้น c = 1.0 ไมโครกรัม/ซม. 3 และ ใช้อะซิโตไนไทรล์

1.3.2 การเตรียมตัวอย่าง

การสกัดของเหลวและของเหลว (LLE) ใช้เพื่อสกัดเบนโซ (เอ)ไพรีนออกจากน้ำ สกัดเบนโซ(เอ)ไพรีนด้วยเอ็น-เฮกเซน เพื่อจุดประสงค์นี้ น้ำที่เลือกที่มีปริมาตร 1,000 ซม. 3 จะถูกนำเข้าสู่กรวยแยกที่มีความจุ 2,000 ซม. 3 และ 25-30 ซม. 3 ของเอ็น-เฮกเซนและโซเดียมคลอไรด์ 20 ซม. 3 (NaCl) ที่มีความเข้มข้นของ c=0, 25 g/cm 3 ถูกเติมและทำการสกัด, เขย่าส่วนผสมเป็นเวลา 10-15 นาที หลังจากนั้นชั้นที่เป็นน้ำจะถูกแยกออกและทำการสกัดอีกสองครั้งโดยไม่ต้องเติม NaCl หลังจากผสมสารสกัดและทำให้แห้งแล้ว ให้ผ่านสารดูดความชื้น ซึ่งเป็นกรวยที่มีชั้นของโซเดียมซัลเฟตสูงอย่างน้อย 2 ซม. ไดคลอโรมีเทนที่มีปริมาตรเท่ากับเอ็น-เฮกเซนสามารถใช้เป็นสารสกัดได้

หลังจากการสกัด สารสกัดจะระเหยเป็นปริมาตร 3 - 5 ซม. 3 บนเครื่องระเหยแบบหมุน - อุปกรณ์สำหรับการกำจัดของเหลวอย่างรวดเร็วโดยการกลั่นภายใต้แรงดันที่ลดลง สารตกค้างจะถูกถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองที่มีความจุ 10 - 15 ซม. 3 และเติม n-hexane หลังจากนั้นสารละลายจะระเหยจนแห้งในสุญญากาศของปั๊มแรงดันน้ำ วางหลอดทดลองในอ่างน้ำที่ อุณหภูมิ 40 - 50 ° C สารตกค้างจะละลายในอะซิโตไนไทรล์ 0.2 - 0.5 ซม. 3 ความเข้มข้นที่ได้จะถูกเก็บไว้เป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที

1.3.3 จบการศึกษา

การสำเร็จการศึกษาจะดำเนินการตาม 5 โซลูชั่นมาตรฐานที่มีความเข้มข้น 0.002; 0.01; 0.02; 0.05 และ 0.1 ไมโครกรัม/ซม.3 การเตรียมสารละลายสำหรับการสอบเทียบได้อธิบายไว้ในตารางที่ 1.5

ตารางที่ 1.5 การเตรียมสารละลายสอบเทียบ

	s, µg/cm3	c0, µg/cm3

สารละลายถูกสร้างขึ้นด้วยอะซิโตไนไทรล์

อย่างน้อยสองโครมาโตแกรมจะถูกบันทึกสำหรับแต่ละโซลูชั่น รูปที่ 1.5 แสดงโครมาโตแกรมของเบนโซ(a)ไพรีนที่มีความเข้มข้น 0.002 ไมโครกรัม/ซม. 3

รูปที่ 1.5 Chromatogram ของ benz (a) pyrene ที่มีความเข้มข้น 0.002 μg / cm 3

ความคลาดเคลื่อนระหว่างพื้นที่ที่ได้รับไม่ควรเกิน 7% ของค่าเฉลี่ยเลขคณิต

จากข้อมูลที่ได้รับ กราฟการสอบเทียบจะถูกสร้างขึ้น (รูปที่ 1.6) ในรูปแบบของการพึ่งพาพื้นที่พีคบนความเข้มข้นของมวล เส้นโค้งการสอบเทียบต้องเป็นเส้นตรง สำหรับแต่ละสารละลาย ความเบี่ยงเบนของความเข้มข้นของมวลที่วัดตามลักษณะการสอบเทียบจากค่าที่ระบุไม่ควรเกิน 12% หากค่าเบี่ยงเบนเกินค่าที่ระบุ ให้ทำการสอบเทียบซ้ำ การสอบเทียบไม่เพียงแต่ดำเนินการก่อนการวัดเท่านั้น แต่ยังรวมถึงหลังจากเปลี่ยนคอลัมน์หรือระหว่างงานบำรุงรักษาโครมาโตกราฟีด้วย

รูปที่ 1.6 การพึ่งพาการสอบเทียบของพื้นที่พีคต่อความเข้มข้นของเบนโซ (เอ)ไพรีน (r 2 = 0.998)

1.3.4 ดำเนินการวิเคราะห์ HPLC

การหาค่าโครมาโตกราฟีของเบนซาไพรีนดำเนินการในคอลัมน์ Agilent 1200 HPLC ประสิทธิภาพของคอลัมน์ควรเป็นอย่างน้อย 5,000 แผ่นตามทฤษฎีโดยอิงจากพีคของเบนซาไพรีน เส้นผ่านศูนย์กลางภายในของเสาคือ 2 มม. คอลัมน์เต็มไปด้วยตัวดูดซับแบบย้อนกลับ (RPS) ในคำจำกัดความนี้ มีการใช้พรีคอลัมน์ที่ทำหน้าที่ป้องกัน เส้นผ่านศูนย์กลางด้านในของพรีคอลัมน์คือ 2 มม. เติมด้วย OFS เดียวกัน

ในฐานะ OFS จะใช้ตัวดูดซับที่มีเฟสพันธะที่ได้รับบนพื้นฐานของซิลิกาเจล ในคำจำกัดความนี้ octadecyl silica gel (C 18) ที่มีขนาดอนุภาค 5 µm และพอลิสไตรีนไฮเปอร์ครอสลิงก์ที่ไม่เข้ากับน้ำซึ่งมีเส้นผ่านศูนย์กลางอนุภาค 3.2 µm และเส้นผ่านศูนย์กลางรูพรุนเฉลี่ย 20–40 E ถูกใช้เป็นตัวดูดซับ ตัวดูดซับนี้มีความเสถียรทางเคมี ที่ pH = 2–7 ประสิทธิภาพการแยกสารมั่นใจได้โดยพื้นที่ผิวที่สูงของอนุภาคตัวดูดซับ เช่นเดียวกับความสม่ำเสมอขององค์ประกอบตัวดูดซับและการบรรจุที่หนาแน่นสม่ำเสมอ ค่าความจุ (k) ของตัวดูดซับดังกล่าวคือ 9.86

เฟสเคลื่อนที่เป็นส่วนผสมของอะซิโตไนไทรล์ - น้ำ เตรียมสารชะในอัตราส่วนปริมาตร 8:2 ในเครื่องแก้วที่มีความจุ 1,000 ซม. 3 เติมน้ำ 200 ซม. 3 แล้วนำไปทำเครื่องหมายด้วยอะซิโตไนไทรล์ ทันทีก่อนใช้งาน สารชะจะถูกเก็บไว้เพื่อกำจัดแก๊สเป็นเวลาอย่างน้อย 4 ชั่วโมง เพื่อการขจัดแก๊สที่เร็วขึ้น ภาชนะที่มีสารชะจะถูกอพยพโดยเชื่อมต่อกับปั๊มฉีดน้ำแล้ววางลงในอ่างอัลตราโซนิก สารชะถูกจ่ายโดยวาล์วจ่ายยาแบบวนซ้ำ (หัวฉีด) ที่มีปริมาตรลูป 10 มม. 3 อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่คือ 200 มม. 3 / นาที

ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ โครมาโตกราฟีจะใช้เวลา 20-30 นาที

1.3.5 การลงทะเบียนและการประมวลผลผลลัพธ์

ตรวจพบเบนโซไพรีนโดยใช้เครื่องตรวจจับเรืองแสง ขอแนะนำให้ลงทะเบียนโครมาโตแกรมที่ความยาวคลื่นกระตุ้น l ex = 365 nm และความยาวคลื่นการลงทะเบียน l register = 400 - 460 นาโนเมตร

เพื่อเพิ่มความไวในเทคนิคนี้ ความยาวคลื่นของการกระตุ้นและการปล่อยแสงโดยการเรืองแสงถูกตั้งโปรแกรมไว้ โหมดการเขียนโปรแกรมแสดงในตารางที่ 1 6

ตารางที่ 1.6 โหมดการเขียนโปรแกรมเมื่อใช้ตัวตรวจจับเรืองแสง

โครมาโตแกรมที่ได้จากการวิเคราะห์น้ำแสดงไว้ในรูปที่ 1.7

รูปที่ 1.7 โครมาโตแกรมของเนื้อหา BP ในน้ำ

จุดสูงสุดของเบนซาไพรีนถูกกำหนดโดยเวลาการกักเก็บ เนื่องจากเป็นคุณลักษณะเชิงคุณภาพของเบนโซ (เอ)ไพรีน ในการหาปริมาณสารเบนโซ (เอ)ไพรีน ให้คำนวณพื้นที่พีค จากนั้นตามกราฟการสอบเทียบจะพบความเข้มข้น

หากความเข้มข้นของเบนโซ (เอ)ไพรีนสูงกว่าความเข้มข้นสูงสุดของสารละลายมาตรฐาน สารละลายที่วิเคราะห์แล้วจะถูกเจือจางและวิเคราะห์ตัวอย่างอีกครั้ง

ความไวในการหาเบนซาไพรีนด้วยวิธีนี้คือ 0.01 ไมโครกรัม/DM 3

1.4 การหาปริมาณเบน (a) pyrene ในน้ำโดย GC

1.4.1 การสุ่มตัวอย่างและการเตรียมการ

ส่วนสำคัญของการวิเคราะห์คือการเลือกและการเตรียมตัวอย่าง น้ำถูกถ่ายหลายครั้งด้วยช่วงเวลาหลายวัน หลังจากนั้นน้ำจะถูกกรองและเก็บตัวอย่าง 0.5 ลิตร เติมโซเดียมคลอไรด์ลงในตัวอย่างและเก็บไว้ในตู้เย็นไม่เกินหนึ่งวัน

เพื่อให้ได้ข้อมูลที่เชื่อถือได้ BP จะถูกดึงออกจากตัวอย่างโดยวิธี LLE สารสกัดคือไดเอทิลอีเทอร์ การสกัดจะดำเนินการสามครั้ง สารสกัดสองครั้งแรกในปริมาณ 50 มล. ของสารสกัด เป็นครั้งที่สาม ปริมาตรของสารสกัดคือ 30 มล. สารสกัดทั้งหมดจะถูกผสมและระเหยในเครื่องระเหยแบบหมุนจนกว่าอีเธอร์จะถูกกำจัดออกจนหมด ตัวอย่างที่ได้จะละลายในน้ำมันเบนซิน 2 มล.

ก่อนการกำหนดหาความดันโลหิตในเชิงปริมาณ ส่วนประกอบของของผสมจะถูกแยกออกโดยโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง (TLC)

TLC เป็นวิธีโครมาโตกราฟีที่มีพื้นฐานมาจากการใช้ชั้นบางๆ ของตัวดูดซับในฐานะเฟสที่อยู่กับที่

ก่อนแยกจานจะถูกแช่ในสารละลายคาเฟอีน 4% ในคลอโรฟอร์มและเปิดใช้งานในเตาอบที่อุณหภูมิ 100 ° C เพื่อขจัดสิ่งสกปรกออกจากจานหลังจากเย็นลงแล้วจะถูกล้างด้วยคลอโรฟอร์มและเปิดใช้งานอีกครั้งใน เตาอบเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 100 เกี่ยวกับ S.

ตัวอย่างที่ละลายในน้ำมันเบนซินจะถูกวางบนจานและโครมาโตกราฟี สารชะล้างเป็นส่วนผสมของไซโคลเฮกเซน - เอ็น-เฮกเซน ในอัตราส่วนปริมาตร 16:1

1.4.2 การหาปริมาณ

การวิเคราะห์เชิงปริมาณตามวิธีนี้ดำเนินการโดยโครมาโตกราฟีแบบแก๊สและของเหลวด้วยเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์ สำหรับการวิเคราะห์นั้นใช้โครมาโตกราฟี "Tsvet - 500" (รูปที่ 1.8) พร้อมเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์

รูปที่ 1.8 แก๊สโครมาโตกราฟี "สี - 500"

ก๊าซพาหะสำหรับ นิยามนี้ไนโตรเจนเสิร์ฟ ไนโตรเจนถูกจ่ายที่อัตราการไหล 3 มล./นาที ใช้ในการวิเคราะห์คอลัมน์ควอตซ์ของเส้นเลือดฝอยที่มีขนาด 25 ม. × 0.32 มม. น้ำมันเมทิลซิลิโคน OV-101 ที่มีความหนาของฟิล์ม 0.4 µm ถูกใช้เป็นเฟสอยู่กับที่ การวิเคราะห์ดำเนินการในโหมดการตั้งโปรแกรมอุณหภูมิตั้งแต่ 210 ถึง 300°C ที่อัตรา 4°C/นาที ตัวอย่าง 1 ไมโครลิตรถูกฉีดโดยใช้ไมโครไซริงก์

รูปที่ 1.9 แสดง BP chromatogram ที่ได้จากวิธีนี้

รูปที่ 1.9 โครมาโตแกรมของ BP ที่ได้รับจาก GC (3-BP)

ในเชิงคุณภาพ BP ถูกกำหนดหาโดยเวลาการคงอยู่ เปรียบเทียบกับเวลาการกักเก็บของตัวอย่างมาตรฐาน ซึ่งคือ 28 นาที

ในเชิงปริมาณ BP ถูกกำหนดโดยวิธีมาตรฐานภายนอก ในการทำเช่นนี้ ให้สร้างกราฟการสอบเทียบสำหรับตัวอย่างมาตรฐานหลายๆ ตัวอย่างที่มีช่วงความเข้มข้น 1-20 ng/ml ความสูงสูงสุดถูกใช้เป็นสัญญาณวิเคราะห์

Benz (a) pyrene เป็นสารก่อมะเร็งในระดับอันตรายที่ 1 ที่เกี่ยวข้องกับ PAHs พบได้ในดิน น้ำ อากาศ อาหาร และเมื่อเข้าสู่ร่างกายก็จะสะสม ดังนั้นความมุ่งมั่นในวัตถุต่าง ๆ จึงมีความสำคัญ

MPC สำหรับ BP ค่อนข้างต่ำ ดังนั้นจึงใช้วิธีการที่ละเอียดอ่อนเพื่อตรวจสอบ ความยากในการพิจารณายังอยู่ในข้อเท็จจริงที่ว่า นอกจาก BP แล้ว ตัวอย่างอาจมีไอโซเมอร์ เช่น benz(e)pyrene และ perylene ซึ่งเวลาการกักเก็บเกือบเท่ากับของ BP กล่าวคือ การมีอยู่ของไอโซเมอร์ทำให้ยากต่อการระบุสาร ปัญหานี้แก้ไขได้ด้วยการแยกส่วนผสมก่อนโดย TLC และใช้ตัวอย่าง BP มาตรฐาน

ในรายวิชานี้ มีการพิจารณาวิธีโครมาโตกราฟีหลายวิธีซึ่งเหมาะสำหรับการตรวจวัดเบนโซ (a) ไพรีน หลังจากทำงานเบื้องต้นกับวรรณคดีแล้ว การเลือกวิธีการสำหรับการกำหนดเชิงปริมาณก็สมเหตุสมผลแล้ว บนพื้นฐานของวิธีการนั้น วิธีการต่างๆ ได้ถูกเลือกและแสดงโครมาโตแกรมที่ได้จากวิธีการเหล่านี้

บรรณานุกรม

1. Traven VF เคมีอินทรีย์ ตำราสำหรับมหาวิทยาลัย: ใน 3 เล่ม / VF Traven - M.: BINOM. แล็บความรู้, 2556. --. - ต. 2. - 2556. - 517 น.

2. Grechishcheva N. Yu. ปฏิกิริยาของกรดฮิวมิกกับไฮโดรคาร์บอนอะโรมาติกโพลีนิวเคลียร์: ด้านเคมีและทางพิษวิทยา: วิทยานิพนธ์ ... สำหรับปริญญาเคมี วิทยาศาสตร์: 02.00.13 / N. Yu. Grechishcheva - ม., 2000. - 157 น.

3.แพท. 2466406 สหพันธรัฐรัสเซีย วิธีการกำหนดปริมาณของ benz (a) pyrene ในปัสสาวะโดย liquid chromatography / Zaitseva N. V. , Ulanova T. S. , Kornazhitskaya T. D. , Kislitsina A. V. , Pshenichnikova E. O. , Permyakova T. S. - - หมายเลข 2011142553/15; ธ.ค. 20.10.11; สาธารณะ 10.11.12, กระทิง. หมายเลข 31.

4. ความเข้มข้นสูงสุดที่อนุญาต (MPC) ของสารเคมี: GN 2.1.7.2041-06 -- [แนะนำ 2549-02-07] - ม.: Standartinform, 2549. - 19.00 น.

5. Tsimbalyuk K. K. ความมุ่งมั่นของ polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH) ในวัตถุสิ่งแวดล้อม (ทบทวน) / K. K. Tsimbalyuk, Yu. M. Denga, V. P. Antonovich // วิธีการและวัตถุของการวิเคราะห์ทางเคมี - 2556. - ต. 8 ลำดับที่ 2 - ส. 50 - 62.

6. Yu. A. Zolotov พื้นฐานของเคมีวิเคราะห์ ปัญหาทั่วไป. วิธีการแยก: ใน 2 เล่ม / Yu. A. Zolotov, E. N. Dorokhova, V. I. Fadeeva และคนอื่น ๆ เอ็ด ยู เอ โซโลโตวา -- ม.: สูงกว่า. ศก., 2545. --. --เจ้าชาย. 1. - 2545. - 351 น.

7. Tsarev N. I. แก๊สโครมาโตกราฟีที่ใช้งานได้จริง สื่อการสอนสำหรับนักศึกษาคณะเคมีในหลักสูตรพิเศษ "วิธีการวิเคราะห์แก๊สโครมาโตกราฟี" / N.I. Tsarev, V.I. Tsarev, I.B. Katrakov - Barnaul.: สำนักพิมพ์ของ Altai State University, 2000. - 156 p.

8. Drugov Yu. S. การวิเคราะห์แก๊สโครมาโตกราฟีของอากาศเสีย / Yu. S. Drugov, A. A. Rodin -- ม.: บีโนม. ห้องปฏิบัติการความรู้ 2558. -- 531 น.

9. Styskin E. L. โครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงในทางปฏิบัติ / E. L. Styskin, L. B. Itsikson, E. V. Braude -- อ.: เคมี, 2529. -- 210 น.

10. Dmitrikov V. P. , Larionov O. G. , Nabivach V. M. การวิเคราะห์โพลีไซคลิกอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง // Uspekhi khimii - พ.ศ. 2529 - ต. 2 ลำดับที่ 4 - ส. 679 -700.

11. น้ำดื่ม. วิธีการกำหนดเนื้อหาของ benzo(a)pyrene: GOST 31860 - 2012. -- [แนะนำ 2014-01-01] - ม.: Standartinform, 2557. - 23.00 น. -- (มาตรฐานระหว่างรัฐ).

12. Borshch N.A. การหาค่า benzapyrene โดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง / N.A. Borshch, S.V. Sidorenko // แนวโน้มสมัยใหม่การพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี - 2559. - V. 1, No. 2 - S.37 - 41.

13. Proskurina N. A. การหาปริมาณโพลีนิวเคลียร์อะโรมาติกไฮโดรคาร์บอนในผลิตภัณฑ์อาหารที่มีไขมันโดยใช้การสกัดด้วยสถานะของแข็ง / N. A. Proskurina, V. A. Davankov, M. M. Ilyin // กระบวนการดูดซับและโครมาโตกราฟี - 2552. - ต. 9 ลำดับที่ 2 - ส. 167 - 176.

14. Nazarkina S. G. Nazarkina S. G. , Purygin P. P. , Bulanova A. V. , Larionov O. G. แก๊สโครมาโตกราฟีในการควบคุมระบบนิเวศน์ของน้ำละลาย // Vestnik SamGU - 2000. - ต. 2, . -- ส. 152 -156.

โฮสต์บน Allbest.ru

...

เอกสารที่คล้ายกัน

อะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน: ลักษณะทั่วไป ศัพท์เฉพาะและไอโซเมอร์ สมบัติทางกายภาพและเคมีของอะโรมาติกไฮโดรคาร์บอน กลไกของปฏิกิริยาของการแทนที่อิเล็กโทรฟิลิกและนิวคลีโอฟิลิกในอนุกรมอะโรมาติก การใช้ arenes ความเป็นพิษของพวกเขา

บทคัดย่อ เพิ่มเมื่อ 12/11/2011


ข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับไวนิลคลอไรด์ - ก๊าซไม่มีสี พิษรุนแรงที่มีผลต่อการกลายพันธุ์ สารก่อมะเร็ง และก่อการก่อมะเร็ง ประวัติความเป็นมาของการค้นพบไวนิลคลอไรด์ คุณสมบัติทางเคมี และวิธีการผลิต ไฮโดรคลอริเนชันของแก๊สตัวเร่งปฏิกิริยาของอะเซทิลีน

การนำเสนอ, เพิ่ม 08/10/2015


การจำแนกอัลดีไฮด์ โครงสร้าง การเกิดขึ้นตามธรรมชาติ ฤทธิ์ทางชีวภาพ การนำไปใช้ การตั้งชื่อคีโตน ประวัติการค้นพบ คุณสมบัติทางกายภาพและเคมี ปฏิกิริยาของการเติมนิวคลีโอฟิลิก วิธีทางเคมีในการระบุอัลดีไฮด์

การนำเสนอ, เพิ่ม 05/13/2014


คุณสมบัติของน้ำและวิธีการทำให้อ่อนตัว ข้อกำหนดสำหรับความกระด้างของน้ำที่ใช้ในการผลิตความร้อนและพลังงาน พื้นฐานทางทฤษฎีและวิธีการกำหนดความกระด้างของน้ำโดยวิธีเชิงซ้อน การสุ่มตัวอย่าง รีเอเจนต์ ความมุ่งมั่น

กระดาษภาคเรียนเพิ่ม 10/07/2552


แนวคิดและการตั้งชื่อฟีนอล คุณสมบัติพื้นฐานทางกายภาพและเคมีของพวกมัน ปฏิกิริยาลักษณะเฉพาะ วิธีการรับฟีนอลและขอบเขตของการใช้งานจริง คุณสมบัติเป็นพิษของฟีนอลและลักษณะของผลกระทบต่อร่างกายมนุษย์

ภาคเรียนที่เพิ่ม 03/16/2011


ประวัติความเป็นมาของการค้นพบสารให้ความหวานคุณสมบัติของมัน วิธีการกำหนดแอสปาร์แตม อุปกรณ์ เครื่องมือ และรีเอเจนต์ สารให้ความหวานในร่างกายมนุษย์ พิษวิทยาและ การวิจัยทางคลินิกสารให้ความหวาน การบริโภคอาหารที่มีกรดอะมิโนฟีนิลอะลานีน

บทคัดย่อ เพิ่ม 04.10.2011


พิษของฟีนอลและฟอร์มัลดีไฮด์ต่อสิ่งมีชีวิต วิธีการกำหนดเชิงคุณภาพ การหาปริมาณฟีนอลในตัวอย่างน้ำธรรมชาติ วิธีการกำหนดความเข้มข้นขั้นต่ำในการตรวจหาสารพิษอินทรีย์ในน้ำ

ภาคเรียนที่เพิ่ม 05/20/2013


โครงสร้างทางเคมี คุณสมบัติ และความสำคัญทางชีวภาพของวิตามินซี ที่ต้องการในแต่ละวัน การทดลองหาไอโอโดเมตริก วิธีการเชิงปริมาณและทางเคมีสำหรับการวิเคราะห์ปริมาณวิตามินในผลิตภัณฑ์อาหารและการเตรียมวิตามิน

ภาคเรียนที่เพิ่ม 03/18/2013


ลักษณะทั่วไปและคุณสมบัติทางเคมีหลักของอนุพันธ์อะซิตามิโนอะโรมาติก วิธีการกำหนดความถูกต้องของอนุพันธ์อะโรมาติกอะซิตามิโน การใช้อนุพันธ์อะซิตามิโนในเภสัชวิทยาและผลกระทบต่อร่างกายมนุษย์

กระดาษภาคเรียนเพิ่ม 11/11/2009


ลักษณะทั่วไปในโครงสร้างของโมเลกุลของแอลกอฮอล์โมโนไฮดริกและโพลีไฮดริก คุณสมบัติของเอทิลแอลกอฮอล์ ผลของแอลกอฮอล์ต่อร่างกายมนุษย์ การสร้างการติดต่อระหว่างวัสดุตั้งต้นและผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา คุณสมบัติทางเคมีโพลีไฮดริกแอลกอฮอล์

4.1.2. วิธีการวัดสัดส่วนมวลของเบนโซ(เอ)ไพรีนในวัตถุดิบอาหาร ผลิตภัณฑ์อาหารและดินโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง

วัตถุประสงค์และขอบเขต

วิธีการนี้มีจุดมุ่งหมายเพื่อกำหนดปริมาณเบนโซ (เอ)ไพรีน (BP) ในวัตถุดิบอาหาร ผลิตภัณฑ์อาหารและดินตามสัดส่วนมวลสารที่ระบุในตาราง 1. ขีดจำกัดล่างของช่วงการวัดสอดคล้องกับ 1/2 ของระดับที่อนุญาต (เนื้อหา) ของสารพิษในผลิตภัณฑ์และวัตถุดิบ ขีดจำกัดบน - ถึงห้าเท่าของระดับที่อนุญาต

Benz (a) pyrene เป็นสารประกอบก่อมะเร็งที่เป็นพิษสูง และเนื้อหาที่อนุญาตในผลิตภัณฑ์อาหารและวัตถุดิบอาหารได้รับการกำหนดโดยกฎสุขาภิบาลและ SanPiN 2.3.2.560-96

เทคนิคนี้สามารถนำไปใช้โดยสถาบันการกำกับดูแลด้านสุขอนามัยและระบาดวิทยาของสหพันธรัฐรัสเซีย ห้องปฏิบัติการขององค์กรและองค์กรอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องกับการวิจัย การวิเคราะห์ทางเคมี และการรับรองผลิตภัณฑ์อาหาร วิธีการนี้ไม่ใช่การเก็งกำไร

ข้าว. 11.14.

• 1. แนฟทาลีน 9. ไครเซน (0.17*)
• 2. อะซีแนฟทีน (1.40*) 10. เบนซ์(ก)ไพรีน
• 3. ฟลูออรีน (2.60*) 11. เบนซ์(b)ฟลูออรีน (0.26*)
• 4. ฟีแนนทรีน *2.40*) 12. เบนซ์(ค)ฟลูออเรนทีน (0.10*)
• 5. แอนทราซีน (0.13*) 13. เบนซ์(เอ)ไพรีน (0.2*)
• 6. ฟลูออแรนทีน (0.74*) 14. ไดเบนซ์(a,b)แอนทราซีน
• 7. Pyrene (0.67*) 15. BeH3(g, h, i)nepHaen (0.21*)
• 8. เบนซ์(เอ)แอนทราซีน (0.07*) 16. อินดีโน(1,2,3-cc1)ไพรีน (0.26*)

เงื่อนไขการวิเคราะห์:

คอลัมน์: Supelcosil® LC RAS ​​​​(250 มม. x 2.1 มม.; 5 µm);

ไล่โทนสี: อะซิโตไนไตรล์ (A) 50-100% น้ำ (B) 50-0%; 200 µl/นาที อุณหภูมิ: 25°C ปริมาตรของตัวอย่าง: 10 µl การตรวจจับ: Sflu ตามโปรแกรม

ลักษณะของข้อผิดพลาดในการวัด

ขีดจำกัดของข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ (±5) ของผลการวัดของเศษส่วนมวลของ BP (ด้วยระดับความเชื่อมั่นที่ 0.95) แสดงไว้ในตาราง หนึ่ง.

ตารางที่ 1.วิเคราะห์วัตถุ ช่วง และลักษณะของการวัด

กลุ่มผลิตภัณฑ์ (อ็อบเจ็กต์ที่วิเคราะห์)	เนื้อหาที่อนุญาต ( IV X),มก./กก.	ช่วงการวัดเศษส่วนมวล BP mg/kg	ค่าสัมประสิทธิ์ การสกัด	ขีดจำกัดข้อผิดพลาดสัมพัทธ์ (±8) %
เนื้อสัตว์รมควัน ปลา และผลิตภัณฑ์ที่มีไขมัน

เครื่องมือวัด อุปกรณ์เสริม วัสดุและรีเอเจนต์

เครื่องมือวัด

โครมาโตกราฟีของเหลว:

• - ไมโครคอลัมน์ "Milichrome-5", TU 25-7405.0009-89, เวอร์ชัน 3 พร้อมเครื่องตรวจจับฟลูออไรเมตริก (FlD) (ตัวเลือกที่ 1)
• - โครมาโตกราฟีของเหลวแบบไอโซเครติกหรือแบบไล่ระดับ เช่น "Kpayeg" (เยอรมนี) ทะเบียนเครื่องมือวัดแห่งสหพันธรัฐรัสเซีย 16848-97 หรือเอกสารแนบโครมาโตกราฟี "VEZHKh-3", LLP "Lumex" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก) พร้อมกับ FLD "Fluorat-02 -2M", LLP "Lumex", ทะเบียนเครื่องมือวัดของสหพันธรัฐรัสเซีย 14093-99 (ตัวเลือก 2)
• - โครมาโตกราฟีของเหลวแบบไอโซเครติกหรือแบบไล่ระดับพร้อม PLD ทุกประเภท เช่น "Kpaerg" (เยอรมนี) ทะเบียนเครื่องมือวัดแห่งสหพันธรัฐรัสเซีย 16848-97 (ตัวเลือก 3)

คอลัมน์โครมาโตกราฟี "Diasfer-110-S 16", TU 4215-001-05451931-94, CJSC "BioKhimMak ST" (มอสโก) ด้วยขนาดมาตรฐานที่สอดคล้องกับตัวแปรของระบบโครมาโตกราฟี:

• - 2 x 80 มม. dp = 5 - 7 µm (ตัวเลือกที่ 1)
• - 2 x 150 มม. dp = 5 - 7 µm (ตัวเลือกที่ 2)
• - 4 x 150 มม. dp = 5 - 7 µm (ตัวเลือกที่ 3)

ฮาร์ดแวร์และซอฟต์แวร์ที่ซับซ้อน "MultiChrom-Spectrum", TU AZHRC

3.036.001, CJSC Ampersend (มอสโก) หรือซอฟต์แวร์อื่นใดที่อนุญาตให้สอบเทียบและกำหนดเชิงปริมาณโดยวิธีมาตรฐานภายนอก

GSO 7515-98 ขององค์ประกอบของสารละลายเบนโซ (a) pyrene ใน acetonitrile ที่มีความเข้มข้นมวลของ benzo (a) pyrene 100 μg / cm 3, AOZT "Ekros" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก)

GSO 7064-93 องค์ประกอบของสารละลายเบนโซ(a)ไพรีนในเฮกเซนที่มีความเข้มข้นมวลของเบนโซ(a)ไพรีน 100 ไมโครกรัม/ซม. 3 , AOZT "Ekros" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก)

เครื่องชั่งห้องปฏิบัติการอิเล็กทรอนิกส์ 4 เซลล์ ความแม่นยำรุ่น VLE 134, GOST 24104-88 หรืออื่นๆ

ไมโครไซริงก์ขนาด 100 ไมโครลิตรจากแฮมิลตัน รุ่นไมโครลิตร #1710 หรือเทียบเท่า

ไมโครปิเปต 0.5; 0.2; 0.1 ไมโครลิตร; GOST 20292-74

กระบอกสูบมิติ 2-25.2-50, 2-100 และ 2-500, GOST 1770-74

ขวดปริมาตร 2-10-2, 2-100-2, GOST 1770-74

ปิเปตไล่ระดับ 1, 2, 5, 10 ซม. 3 , GOST 29227-91

รีเอเจนต์และวัสดุ

อะซีโตไนไตรล์สำหรับโครมาโตกราฟีของเหลว OP-3 ความบริสุทธิ์สูง TU 6-09-14-2167-84 แก้ไขแล้ว

น้ำกลั่น TU 6-09-2502-77

เฮกเซน, บริสุทธิ์ทางเคมี, TU 6-09-3375-78, ทำให้แห้งบน Na 2 ส 04 , แก้ไขแล้ว.

เบนซิน, เคมีบริสุทธิ์, GOST 5955-75, ทำให้แห้งเหนือNa 2 ส 04 , แก้ไขแล้ว.

แอนไฮดรัสโซเดียมซัลเฟต บริสุทธิ์ทางเคมี GOST 4166-76

ตลับเข้มข้น "Diapak": A-3, P-3, C; TU 4215-002-05451931-94, ZAO BioKhimMak ST (มอสโก).

อุปกรณ์เสริม

ระบบกรองและขจัดแก๊สของสารชะ CJSC "BioKhimMak ST" (มอสโก) หรืออื่นๆ

ขวดแก้วขนาด 1.8 และ 5.0 ซม. 3 หลอดสำหรับโซลูชันการสอบเทียบและการวิเคราะห์พร้อมฝาเกลียวและปะเก็นเทฟลอนจาก Supelco หมายเลขแค็ตตาล็อก 2-6951, 2-7037 และ

2-7039 หรือเทียบเท่า

ไมโครมิกเซอร์ PPE-3, "Ekros" (เซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก)

เครื่องระเหยแบบหมุน IR-1M2, TU 25-1173.102-84 หรืออื่นๆ

ขวดก้นแหลมพร้อมจุกที่มีความจุ 25, 10 และ 5 ซม. 3, GOST 25336

อุปกรณ์สำหรับเป่าสารละลายในกระแสไนโตรเจน พร้อมกับบล็อกอะลูมิเนียมควบคุมด้วยอุณหภูมิ (อ่างแบบแห้งด้วยลม) SP "BioMark" (Lvov) หรืออื่นๆ

ตัวกรองเมมเบรนที่มี dp = 0.4-0.5 µm

อุปกรณ์สำหรับสร้างสุญญากาศประมาณ 7 มม. ปรอท ศิลปะ. (ปั๊มฉีดน้ำ GOST 25336; ปั๊มสุญญากาศวงแหวนน้ำ Begemot, UVK-RK2/1, CJSC BioKhimMak ST, มอสโก)

อุปกรณ์เตรียมตัวอย่างสุญญากาศ (ท่อร่วมสูญญากาศ) หรืออื่นๆ ที่มีตัวรับตัวอย่างที่มีความจุอย่างน้อย 10 ซม. 3

กระติกน้ำ Buechner กรวย Bunsen ที่มีความจุอย่างน้อย 500 และ 200 ซม. 3 ตามลำดับ GOST 1770

กรวยแยกที่มีความจุ 100 และ 500 ซม. 3, GOST 25336

ขวดทรงกรวยก้นแบนพร้อมจุกที่มีความจุ 50, 100 และ 250 ซม. 3, GOST 25336

ขวดรูปลูกแพร์พร้อมจุกที่มีความจุ 50 และ 100 ซม. 3, GOST 25336

กรวยกรวยที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางอย่างน้อย 10 ซม. GOST 1770

กระดาษกรองประเภท "เทปสีน้ำเงิน"

สำลีทางการแพทย์ไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ, สำลี.

วิธีการวัด

เทคนิคประกอบด้วยขั้นตอนหลักดังต่อไปนี้:

• - การสกัดเบื้องต้นด้วยเฮกเซนและการสกัดซ้ำเป็นอะซิโตไนไทรล์ BP จากตัวอย่างผลิตภัณฑ์ที่รมควัน
• - การสกัด BP เบื้องต้นที่มีส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์จากตัวอย่างเมล็ดพืชหรือดิน
• - ความเข้มข้นและการทำให้บริสุทธิ์ของสารสกัดหลักโดยการสกัดแบบโซลิดเฟส
• - การเจือจางของสารสกัดตัวอย่างที่เตรียมไว้ด้วยส่วนผสมของอะซิโตไนไทรล์-น้ำ
• - การสอบเทียบโครมาโตกราฟีตามสารละลายด้วยค่าที่ทราบของความเข้มข้นมวลของ BP
• - การวิเคราะห์สารละลายของสารสกัดตัวอย่างที่เตรียมไว้โดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) พร้อมการลงทะเบียนสัญญาณเรืองแสง
• - การระบุ BP ที่กำหนดโดยพารามิเตอร์การเก็บรักษา
• - การคำนวณความเข้มข้นของมวล BP ตามสัญญาณการวิเคราะห์ที่ลงทะเบียนและลักษณะการสอบเทียบ
• - การคำนวณเศษส่วนมวลของ BP ตามความเข้มข้นของมวล BP มวลของตัวอย่างอาหารและปริมาตรของสารละลายของสารสกัดที่เตรียมไว้

ข้อกำหนดด้านความปลอดภัย

เมื่อทำงานกับสารเคมีที่ใช้แล้ว มีความจำเป็นต้องปฏิบัติตามข้อกำหนดด้านความปลอดภัยที่กำหนดไว้สำหรับการทำงานกับสารพิษ สารกัดกร่อนและสารไวไฟ GOST 12.1.018-86 และ GOST 12.1.004-76 ข้อกำหนดด้านความปลอดภัยจากอัคคีภัย GOST 12.1.004- 76.

หากสารละลาย BP โดนผิวหนัง" หรือพื้นผิวของวัตถุ จะต้องบำบัดด้วยน้ำและผงซักฟอก ตามด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ สารละลายควรเก็บไว้ในตู้เย็นในบรรจุภัณฑ์ที่ปิดสนิท

เมื่อใช้งานระบบสำหรับ HPLC และดำเนินการวัดที่เกี่ยวข้อง จำเป็นต้องปฏิบัติตามกฎความปลอดภัยทางไฟฟ้า GOST

12.1.019-79 และคู่มือการใช้งานสำหรับอุปกรณ์

ข้อกำหนดคุณสมบัติผู้ปฏิบัติงาน

บุคคลที่ได้รับอนุญาตให้ทำงาน:

• - มีคุณสมบัติเป็นวิศวกรเคมีหรือช่างเทคนิคเคมี
• - มีประสบการณ์ในห้องปฏิบัติการเคมี
• - ผู้ที่สำเร็จหลักสูตรการฝึกอบรมที่เกี่ยวข้องและการฝึกงานในห้องปฏิบัติการที่ได้รับการรับรองให้ทำการวิเคราะห์โดยใช้ HPLC
• - ได้รับผลบวกระหว่างการปฏิบัติงานของการควบคุม

เงื่อนไขการวัด

การเตรียมตัวอย่าง การเตรียมสารละลาย การเตรียมและประสิทธิภาพของการวัดจะดำเนินการที่อุณหภูมิแวดล้อม 18-25 ° C ความดันบรรยากาศ 84.0-100.7 kPa (630-800 mm Hg) ความชื้นในอากาศไม่เกิน 80% ( ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส)

เมื่อทำการวัดในห้องปฏิบัติการ ต้องเป็นไปตามเงื่อนไขต่อไปนี้: แรงดันไฟหลัก 220 ± 10 V, ความถี่หลัก 50zh 1 Hz การวัดจะดำเนินการภายใต้สภาวะที่แนะนำโดยคำอธิบายและคู่มือการใช้งานของอุปกรณ์

เตรียมเข้าวัด

เครื่องแก้ว

เครื่องแก้วที่ใช้แล้วก่อนใช้งานต่อไปจะถูกล้างด้วยตัวทำละลายที่ใช้แล้วและล้างให้สะอาด น้ำร้อนด้วยผงซักล้างใด ๆ ล้างออกด้วยน้ำกลั่นและน้ำที่ผ่านการกลั่นแล้วเช็ดให้แห้ง เก็บจานสะอาดโดยการปิดด้วยจุกไม้ก๊อกหรือสำลีก้าน

การสุ่มตัวอย่าง การจัดเก็บ และการจัดการ

การสุ่มตัวอย่างและการหาค่าเฉลี่ยจะดำเนินการตามเอกสารข้อบังคับสำหรับผลิตภัณฑ์แต่ละประเภท (GOST 13586.3-83, GOST 27668-88, GOST 9792-73, GOST 7631-85) ค่า BP ที่กำหนดนั้นสกัดจากตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ที่รมควันโดยการสกัดด้วยเฮกเซนแบบแห้ง เมื่อสกัด BP จากตัวอย่างเมล็ดพืชหรือดิน จะใช้ส่วนผสมของน้ำ-อะซิโตไนไตรล์ (16:84) ความเข้มข้นที่ตามมาและการทำให้บริสุทธิ์ของสารสกัดตัวอย่างหลักที่มี BP โดยไม่คำนึงถึงลักษณะของผลิตภัณฑ์เริ่มต้น จะดำเนินการตามรูปแบบที่ซับซ้อนของการสกัดแบบโซลิดเฟสโดยใช้ตลับความเข้มข้นสามตลับ Diapak A-3, P-3, S .

ตัวอย่างที่เตรียมไว้ (สารสกัดจากตัวอย่าง) จะละลายในส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์ (70:30)

การวัดเศษส่วนมวลของ BP แต่ละครั้งรวมถึงการเตรียมการและการวิเคราะห์ด้วยโครมาโตกราฟีของตัวอย่างอย่างน้อยสองตัวอย่าง

การเตรียมของผสมตัวทำละลาย

สารผสมของตัวทำละลายเตรียมโดยวิธีปริมาตรในกระบอกสูบแบบไล่ระดับ ปริมาตรที่ต้องการของอะซิโตไนไทรล์และน้ำจะถูกวัดด้วยกระบอกสูบแยกระดับแล้วผสม Extractant A: acetonitrile-water (84:16).

การเตรียมสารสกัด

ในการเตรียมอะซิโตไนไตรล์และเฮกเซนที่อิ่มตัวร่วมกัน ให้เขย่าอะซิโตไนไทรล์ประมาณ 300 ซม. 3 และเฮกเซน 100 ซม. 3 ในกรวยแยกที่มีความจุ 500 ซม. 3 หลังจากแยกตัวทำละลายแล้ว ชั้นจะถูกแยกออกจากกัน: ชั้นล่าง (อะซิโตไนไตรล์อิ่มตัวด้วยเฮกเซน - สารสกัด B) และชั้นบน (เฮกเซนอิ่มตัวด้วยอะซิโตไนไตรล์ - สารสกัด C) เฟสจะถูกทิ้ง

การเตรียมสารชะ

สำหรับการวัด HPLC ของผสมอะซิโตไนไตรล์กับน้ำถูกเตรียมในอัตราส่วนต่อไปนี้: (90:10) - ตัวชะ 90, (84:16) - ตัวชะ 84, (80:20) - ตัวชะ 80, (70:30) - ตัวชะ 70 . สารชะสำเร็จรูปจะถูกกรองผ่านตัวกรองเมมเบรนและดำเนินการสุญญากาศหรือระบายความร้อน

การเตรียมสารละลายสอบเทียบ

GSO ขององค์ประกอบของสารละลาย BP ใน acetonitrile (ดูด้านบน) ถูกเจือจางด้วยส่วนผสมของ acetonitrile-water (7:3) ก่อนใช้งาน ปิเปตถ่ายแล้ว

สารละลายสต็อก 1.0 ซม. 3 วางในขวดปริมาตรที่มีความจุ 100 ซม. 3 และเติมตัวทำละลายลงในเครื่องหมาย ต่อไป ปริมาตรของสารละลายที่ได้จะถูกถ่ายด้วยปิเปต วางในขวดปริมาตรที่มีความจุ 10 ซม. 3 และเติมตัวทำละลายลงในเครื่องหมาย ปริมาตรของสารละลายที่สอดคล้องกันที่ใช้สำหรับการเจือจางและความเข้มข้นของสารละลายสอบเทียบ 2-5 (ตัวเลือกที่ 1) และ 3-7 (ตัวเลือก 2, 3) แสดงในตาราง 2. เมื่อใช้ GSO ขององค์ประกอบของสารละลาย BP ในเฮกเซน (ดูด้านล่าง) หลังจากการระเหยตัวทำละลายภายใต้สภาวะที่กำหนดด้านล่าง กากแห้งจะละลายอีกครั้งในอะซิโตไนไทรล์และเจือจางตามที่อธิบายไว้ข้างต้น โดยคำนึงถึงมูลค่าของใบรับรองที่ผ่านการรับรอง ความเข้มข้นของ GSO

ตารางที่ 2โซลูชันสำหรับการสอบเทียบในการวิเคราะห์เบนโซไพรีน (BP)

ความเข้มข้นมวลของ BP (ค่ารับรองของ GSO), mcg/cm3	สารละลายเจือจางเบื้องต้น		การสอบเทียบ
				ความเข้มข้นมวลของ BP, µg/cm3

*ไม่ใช้สำหรับการสอบเทียบโดยตรงของระบบโครมาโตกราฟี

การเตรียมระบบโครมาโตกราฟี

โครมาโตกราฟีเปิดใช้งานและเตรียมพร้อมสำหรับการทำงานตามคำอธิบายและคู่มือการใช้งาน ติดตั้งคอลัมน์ "Diasfer-110-C 16" ด้วยขนาดมาตรฐานตามตัวเลือกโครมาโตกราฟี (ดูด้านบน) สารชะที่มีความเข้มข้นสูงสุดของอะซีโตไนไตรล์ถูกสูบผ่านระบบโครมาโตกราฟีจนกว่าเส้นฐานของเครื่องตรวจจับจะเสถียร จากนั้นจึงปรับสภาพภายใต้สภาวะเริ่มต้นของการไล่ระดับสีตามส่วนที่เกี่ยวข้องของ "เงื่อนไขการวิเคราะห์"

การเตรียมตลับความเข้มข้น

ตลับเข้มข้น Diapak A-3 และ P-3 เตรียมไว้สำหรับการทำงานดังนี้:

• 1. เทตัวดูดซับ Diapak A หรือ P แบบแห้ง 3 ซม.3 ลงในตัวเรือนโพลีโพรพิลีนขนาด 10 ซม. พร้อมตัวกรองแบบเปลี่ยนได้ที่ส่วนล่าง ส่วนที่ว่างด้านบนของตัวเรือนจะใช้เป็นกรวยสำหรับใส่ตัวอย่างหรือสารชะ
• 2. หนีบตลับในแนวตั้งในอุปกรณ์สูญญากาศที่เหมาะสมแล้วแตะเพื่อสร้างชั้นดูดซับในแนวนอนที่เรียบ สำหรับการเตรียมตลับ Diapak A-3 ขั้นสุดท้าย ก็เพียงพอที่จะแก้ไขชั้นตัวดูดซับด้วยสำลีก้อนเล็กๆ
• 3. ในการเตรียมคาร์ทริดจ์ Diapak P-3 ตัวดูดซับจะถูกล้างอย่างต่อเนื่องด้วยน้ำมันเบนซิน อะซิโตน 10 ซม. 3 และ สารสกัดAที่สุญญากาศต่ำ (อัตราการหยดไม่เกิน 1-2 หยดต่อวินาที) ป้องกันไม่ให้อากาศเข้าสู่ตัวดูดซับ หลังจากเติมอะซิโตนลงในคาร์ทริดจ์แล้ว ตัวดูดซับจะได้รับอนุญาตให้จับตัวได้ ตัวกรองพอลิเมอร์ด้านบนถูกนำมาใช้ มันถูกบีบอัดให้อยู่เหนือชั้นบนของตัวดูดซับ และการล้างจะดำเนินต่อไป พอไปถึง สารสกัดAระดับเหนือตัวกรอง 2-3 ซม. หยุดการซักและตลับหมึกปิดผนึกด้วยปลั๊กด้านล่างและฝาปิดด้านบน (สำหรับจัดเก็บ) ในกรณีที่แห้งโดยไม่ได้ตั้งใจ ตลับจะถูกล้าง สารสกัด A.ก่อนที่จะใช้ตัวอย่าง ปลั๊กจะถูกลบออกและด้วยสุญญากาศที่อ่อนแอ ส่วนที่เหลือของส่วนผสมระหว่างน้ำกับอะซิโตไนไตรล์จะถูกส่งไปยังระดับของตัวกรองด้านบน จากนั้นจึงเทสารละลายทดสอบลงในทันที การสร้างคาร์ทริดจ์แบบใช้ซ้ำได้ Diapak P-3 ดำเนินการตามรูปแบบที่คล้ายกัน ไม่รวมการถอดตัวกรองด้านบน

ตลับเข้มข้น Diapak C เตรียมไว้สำหรับการทำงานดังนี้:

• 1. แคปซูลโพลีโพรพิลีนสำเร็จรูปพร้อมตัวดูดซับ Diapak S 1 ซม. 3 ปิดผนึกด้วยปลั๊ก หลังจากถอดปลั๊กแล้ว คาร์ทริดจ์พร้อมสำหรับการทำงานโดยส่งเฮกเซน 5 ซม. 3 ผ่านเข้าไปในนั้นด้วยหลอดฉีดยาในอัตราหยด 1-2 หยดต่อวินาที
• 2. ตัวอย่างถูกนำไปใช้โดยแรงโน้มถ่วง โดยใช้ตัวโพลีโพรพิลีนเปล่าที่มีปริมาตร 10 ซม. 3 เป็นกรวย โดยยึดแน่นกับส่วนบนของแคปซูล Diapak C

การเตรียมตัวอย่างสำหรับการวัด

การสกัดสารเฮกเซนของเบนโซ(เอ)ไพรีนจากตัวอย่างผลิตภัณฑ์รมควันตัวอย่างผลิตภัณฑ์รมควัน 10.0 กรัมบดในครกที่มีโซเดียมซัลเฟต 30 กรัม ของผสมจะถูกถ่ายโอนในเชิงปริมาณไปยังขวดก้นแบนขนาด 100 ซม. 3 และสกัดด้วยเฮกเซน 40 ซม. 3 เป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีด้วยการกวน สารสกัดเฮกเซนหลักของไขมันทั้งหมดของตัวอย่างจะถูกแยกออกและผ่านโซเดียมซัลเฟต 10 กรัมลงในขวดปอก ทำซ้ำขั้นตอนการสกัดสองครั้งด้วยเฮกเซน 20 ซม. 3 สองปริมาตร และส่งส่วนของสารสกัดผ่านสารดูดความชื้นลงในขวดกลั่นเดียวกัน ระเหยเฮกเซนบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 35 ° C จนกว่ากลิ่นจะหายไป

สารสกัดไขมันทั้งหมดละลายใน 20 ซม. 3 สารสกัด B,ถ่ายโอนในเชิงปริมาณลงในทรงกระบอกที่สำเร็จการศึกษาที่มีความจุ 50 ซม. 3 และนำปริมาตรของสารละลายไปที่ 40.0 ซม. 3 ด้วยตัวทำละลายเดียวกัน

20.0 ซม. 3 ของสารละลายที่ได้จะถูกถ่ายโอนไปยังกรวยแยกที่มีความจุ 100 ซม. 3 และ BP จะถูกแยกออกมาอีกครั้งเป็นอะซิโตไนไทรล์ด้วยปริมาตร 20 ซม. 3 ปริมาตร สารสกัด B.แต่ละครั้งที่แยกเฟสได้อย่างสมบูรณ์ที่สุด ชั้นล่างจะถูกถ่าย (สารสกัดอะซิโตไนไตรล์ของ BP) และระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °Сได้ถึงปริมาตร 10-15 ซม. 3 ในเชิงปริมาณ (โดยใช้อะซิโตไนไทรล์) ให้ถ่ายสารละลายลงในกระบอกวัดที่มีความจุ 25 ซม. 3 นำปริมาตรเป็น 21.0 ซม. 3 ด้วยอะซิโตไนไทรล์ เติมน้ำกลั่น 4.0 ซม. 3 แล้วผสมให้ละเอียดตามผลลัพธ์ สารสกัดจากน้ำ-acetonitrile ของ BP

การสกัดเบนโซ(เอ)ไพรีนจากตัวอย่างเมล็ดพืชหรือดินที่มีส่วนผสมของน้ำอะซิโตไนไทรล์

ตัวอย่าง 10-25 กรัมจะถูกถ่ายโอนไปยังขวดก้นแบนโดยเติม 50-125 ซม. 3 สารสกัดเอ,สังเกตอัตราส่วน 1:5 ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์ต่อปริมาตรของสารสกัดอย่างเคร่งครัดและกวนเป็นเวลา 1 ชั่วโมง กรองแล้ว สารสกัดจากน้ำ-acetonitrile ของ BPข้าม กระดาษกรองบนกรวย Buchner ภายใต้สุญญากาศและบีบตะกอนบนตัวกรองออก

การทำให้บริสุทธิ์และความเข้มข้นของสารสกัดหลักจากเมล็ดพืชหรือผลิตภัณฑ์ที่รมควัน

ผ่านตลับ Diapak A-3 25.0 cm 3 แล้ว 3 ซม. 3 สารสกัดAในอัตราหยด 2-3 หยดต่อวินาทีลงในขวดรับ

สารชะที่เก็บรวบรวมจะถูกส่งผ่านคาร์ทริดจ์ Diapak P-3 ที่เตรียมไว้ แล้วตามด้วยอะซิโตไนไทรล์ 5 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาที โดยทิ้งการชะล้าง เศษส่วนเป้าหมายที่มี BP ถูกชะออกจากคาร์ทริดจ์ที่มีส่วนผสมของเบนซีน-อะซีโตไนไตรล์ (1:1) ในปริมาตร 7 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาทีลงในขวดกลั่น สารชะจะถูกระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °C เติมเฮกเซน 0.5 ซม. 3 ลงในขวดและเขย่าให้ละเอียดบนไมโครมิกเซอร์จนสารตกค้างที่แห้งละลายหมด

การทำให้บริสุทธิ์เบื้องต้นและความเข้มข้นของสารสกัดจากดินเบื้องต้น

ผ่านตลับ Diapak A-3 5.0 cm 3 น้ำ-acetonitrile สารสกัดจาก BP,แล้ว 3 ซม. 3 สารสกัดAในอัตราหยด 2-3 หยดต่อวินาทีลงในขวดรับ ย้ายสารชะไปยังกระบอกสูบไล่ระดับความจุ 25 ซม. 3 ล้างขวดด้วยปริมาตร 5 ซม. 3 สองปริมาตร สารสกัดAและนำปริมาตรของสารละลายในกระบอกสูบมาที่ 20 ซม. 3 .

สารชะเจือจาง 5.0 ซม. 3 จะถูกส่งผ่านตลับกรอง Diapak P-3 ที่เตรียมไว้ ตามด้วยอะซิโตไนไทรล์ 5 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาที โดยทิ้งการชะล้าง เศษส่วนเป้าหมายที่มี BP ถูกชะออกจากคาร์ทริดจ์ที่มีส่วนผสมของเบนซีน-อะซีโตไนไตรล์ (1:1) ในปริมาตร 7 ซม. 3 ที่อัตราการหยด 1-2 หยดต่อวินาทีลงในขวดกลั่น สารชะจะถูกระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °C เติมเฮกเซน 0.5 ซม. 3 ลงในขวดและเขย่าให้ละเอียดบนไมโครมิกเซอร์จนสารตกค้างที่แห้งละลายหมด

การทำให้บริสุทธิ์ของสารสกัด

สารละลายตัวอย่าง 0.5 ซม. 3 ในเฮกเซนถูกนำไปใช้กับคาร์ทริดจ์ Diapak C ที่เตรียมไว้ด้วยแรงโน้มถ่วง จากนั้นล้างขวดด้วยเฮกเซน 0.5 ซม. 3 สองส่วน และนำไปใช้กับคาร์ทริดจ์ตามลำดับ โดยทิ้งการล้างทั้งหมด BP ถูกชะด้วยน้ำมันเบนซินในปริมาตร 2.0 ซม. 3 ในอัตรา 1-2 หยดต่อวินาทีลงในขวดปอกและระเหยบนเครื่องระเหยแบบหมุนที่อุณหภูมิไม่เกิน 50 °C ละลายสารตกค้างแบบแห้งของสารสกัดของตัวอย่าง BP ในส่วนผสมของอะซีโตไนไตรล์-น้ำ (7:3) ซึ่งระบุปริมาตรไว้ในส่วน "สภาวะในการวัด" สำหรับแต่ละตัวแปรของระบบโครมาโตกราฟี (ดูด้านล่าง)

การสำเร็จการศึกษาและการวัดผล

การสอบเทียบโครมาโตกราฟี

โครมาโตกราฟีได้รับการสอบเทียบโดยการป้อน (ภายใต้เงื่อนไขของการวัด BP) ตามลำดับ (ภายใต้เงื่อนไขของการวัด BP) ปริมาตรระบุของสารละลายสอบเทียบ (ตารางที่ 2) ตามลำดับความเข้มข้นของมวลจากน้อยไปหามาก สารละลายแต่ละชนิดถูกฉีดเข้าไปในโครมาโตกราฟีอย่างน้อยสองครั้ง ด้วยการปรับที่ถูกต้องของระบบโครมาโตกราฟี ความสูงของพีคบนโครมาโตแกรมของสารละลายสอบเทียบที่มีความเข้มข้นต่ำสุดควรเกินระดับเสียงรบกวนที่ตรวจวัดพื้นฐานอย่างน้อย 10 เท่า

หลังจากประมวลผลทางคณิตศาสตร์ของโครมาโตแกรม พารามิเตอร์การคงอยู่และพื้นที่พีคจะคงที่ และสร้างคุณลักษณะการสอบเทียบ (GC) ขึ้น ซึ่งสะท้อนการพึ่งพาค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีคต่อความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายสอบเทียบ

ควบคุมความถูกต้องของการสร้างลักษณะการสอบเทียบ

คุณลักษณะการสอบเทียบจะถูกสร้างขึ้นใหม่เมื่อเปลี่ยนคอลัมน์ หลังจากดำเนินการบำรุงรักษาและบำรุงรักษาเชิงป้องกัน โดยมีผลเชิงลบของการตรวจสอบความเสถียรของ GC (ดูด้านล่าง)

การหาปริมาณเบนโซ(เอ)ไพรีน

เงื่อนไขการวัด (ตัวเลือกที่ 1)

สำหรับการวิเคราะห์ สารสกัดที่เตรียมไว้ของตัวอย่าง BP จะถูกละลายใน 0.1 ซม. 3 ของส่วนผสมอะซิโตไนไทรล์กับน้ำ

โหมดการทำงานของ FMD และ UVPA ตั้งค่าจากแป้นพิมพ์คอมพิวเตอร์ตามคู่มือผู้ใช้ (HSS "MultiChrome-Spectrum") และควบคุมบนจอภาพในรูปแบบต่อไปนี้:

เครื่องตรวจจับฟลูออโรเมตริก

• ความยาวคลื่นกระตุ้น 296 นาโนเมตร;
• ความยาวคลื่นปล่อย - ตัวกรองแสงหมายเลข 2 (มากกว่า 380 นาโนเมตร);
• เวลาในการวัด 0.2 วินาที

เครื่องจ่ายอัตโนมัติ

• ปริมาณการงอกใหม่ 0.4 ซม. 3 ;
• ปริมาณตัวอย่าง 0.04 ซม. 3 ;
• อัตราการไหล 0.15 ซม. 3 /นาที;
• ความเร็วในการรับสมัคร 0.3 ซม. 3 /นาที;
• เวลาเก็บ BP 11 นาที
• องค์ประกอบของสารชะในภาชนะและรูปแบบการรวบรวมความลาดชันของ acetonitrile แสดงไว้ในตาราง 3.

ตารางที่ 3สารชะ

เงื่อนไขการวัด (ตัวเลือกที่ 2)

สำหรับการวิเคราะห์ สารสกัดตัวอย่าง BP ที่เตรียมไว้ (ดูด้านบน) ละลายใน 0.5 ซม. 3 ของส่วนผสมอะซิโตไนไทรล์กับน้ำ

• กรองบนเส้นกระตุ้น - "X4";
• กรองบนสายการปล่อย - "KhZ";
• ปริมาณตัวอย่าง 0.02 ซม. 3 ;
• ความไวเป็นค่าเฉลี่ย
• การปรับให้เรียบ - 4;
• ระดับ "พื้นหลัง" จะถูกเลือกตามผลการลงทะเบียนของโครมาโตแกรมทดสอบของสารละลายสอบเทียบหมายเลข 3

• อัตราการไหล 0.2 ซม. 3 /นาที;
• สารชะ 84;
• เวลาในการรักษา BP ประมาณ 12 นาที

โหมดแยกการไล่ระดับสี:

• อัตราการไหล 0.25 ซม. 3 /นาที;
• สารชะ 100 ในตัวชะ70ใน 20 นาที;

เงื่อนไขการวัด (ตัวเลือกที่ 3)

สำหรับการวิเคราะห์ สารสกัดที่เตรียมไว้ของตัวอย่าง BP จะถูกละลายใน 0.5 ซม. 3 ของส่วนผสมอะซิโตไนไทรล์กับน้ำ

• ความยาวคลื่นกระตุ้น 375 นาโนเมตร;
• ความยาวคลื่นการปล่อย 405 นาโนเมตร;
• อัตราการไหล 0.8 ซม. 3 /นาที;
• ปริมาณตัวอย่าง 0.02 ซม. 3 ;
• เวลาคงที่ 1.0 วินาที

โหมดการแยกไอโซเครต:

• สารชะ 84;
• เวลาเก็บรักษา BP ประมาณ 12 นาที;

โหมดแยกการไล่ระดับสี:

• การไล่ระดับเชิงเส้นจาก 30 เป็น 70% สารชะ 100 ในตัวชะ70ใน 20 นาที;
• เวลาเก็บรักษา BP ประมาณ 14 นาที

การได้มาและการประมวลผลโครมาโตแกรม

นำสารละลายตัวอย่างไปใส่ในโครมาโตกราฟีสองครั้ง การระบุ BP ดำเนินการบนพื้นฐานของการเปรียบเทียบพารามิเตอร์การคงอยู่สูงสุดในโครมาโตแกรมของสารสกัดตัวอย่างและสารละลายสอบเทียบ พารามิเตอร์การเก็บรักษาโดยประมาณระบุไว้ในส่วน "เงื่อนไขการวัด" การระบุสารประกอบที่กำหนดที่เชื่อถือได้นั้นสอดคล้องกับความแตกต่างระหว่างค่าพารามิเตอร์การกักเก็บสำหรับสารละลายสอบเทียบและตัวอย่าง ซึ่งไม่เกิน 0.2 นาที

การเจือจางสารละลายสารสกัด

ดำเนินการในกรณีที่ความเข้มข้นของมวลของ BP ที่กำหนดเกินความเข้มข้นสูงสุดของมวลในสารละลายสำหรับการสอบเทียบ สารละลายสารสกัดถูกเจือจางสองครั้ง (อัตราส่วนการเจือจาง, dil = 2) โดยใช้ปริมาตรที่เท่ากันของสารละลายนี้และส่วนผสมของอะซิโตไนไทรล์-น้ำ (70:30) แล้วผสมให้เข้ากัน ในกรณีที่การเจือจางเพียงครั้งเดียวไม่ได้ขจัด "นอกสเกล" ให้ทำซ้ำขั้นตอน (ระดับของการเจือจาง dil = 4)

การประมวลผลผลการวัด

คำนวณค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค (สัญญาณเอาท์พุตโครมาโตกราฟี) สำหรับการฉีดสารละลายตัวอย่างเข้าไปในโครมาโตกราฟีสองครั้ง ควบคุมการบรรจบกันของสัญญาณเอาท์พุต (ดูด้านล่าง)

จากการพึ่งพาการสอบเทียบ จะพบค่าความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลาย ซึ่งสอดคล้องกับค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค

เศษส่วนมวลของ BP (I^), มก./กก. ในตัวอย่างที่ i (ผลลัพธ์ของการกำหนด) คำนวณโดยสูตร

โดยที่ Cbp คือความเข้มข้นมวลของสารที่วิเคราะห์ในสารละลายของการแยกตัวอย่างที่ i ของ BP, μg/cm 3 (คำนวณจากการพึ่งพาการสอบเทียบ ตามค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค) Vp- ปริมาตรของสารละลายสารสกัดของตัวอย่าง /-th ของ BP, cm 3; R- ระดับการสกัด BP ในขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างตามตาราง 2; เอ็มเท่ากับ- มวลของส่วนตัวอย่างที่สอดคล้องกับสัดส่วนของสารสกัดน้ำ-acetonitrile ของ BP ที่ใช้สำหรับการทำให้บริสุทธิ์และการกำหนดโครมาโตกราฟีที่ตามมา - มวลที่เท่ากันของตัวอย่างซึ่งเท่ากับ 5.0 กรัม (เม็ด, ผลิตภัณฑ์รมควัน) หรือ 0.25 กรัม (ดิน)

ในกรณีของการเจือจางของสารสกัด (ดูด้านบน) เศษส่วนมวลของ BP ( ว,-,มก./กก.) ในมิติ / - คำนวณโดยสูตร

ที่ไหน wj- ค่าที่ได้จากสูตร (II. 1), dil - ระดับการเจือจาง (ดูด้านบน)

คำนวณค่าเฉลี่ยของเศษส่วนมวลของ BP สำหรับสองตัวอย่าง (ผลการวิเคราะห์):

ควบคุมการลู่เข้าของผลลัพธ์การหาเศษส่วนมวลของ BP (ดูด้านล่าง)

การลงทะเบียนผลการวัด

ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ (การวัด) ของเศษส่วนมวลของ BP ในวัตถุที่ถูกกำหนดจะแสดงในรูปแบบ

ที่ไหน ว-เศษส่วนมวลของ BP คำนวณโดยสูตร (II.3)

หากตรวจไม่พบ BP ผลการวัดจะแสดงในรูปแบบ

โดยที่ P "ds คือเนื้อหาที่อนุญาตของ BP ตามตารางที่ 1

การควบคุมข้อผิดพลาด MVI

การควบคุมคอนเวอร์เจนซ์ของสัญญาณเอาท์พุตโครมาโตกราฟี

การควบคุมจะดำเนินการระหว่างการสอบเทียบและการวิเคราะห์ของแต่ละตัวอย่างที่สัมพันธ์กับสัญญาณเอาท์พุต (ค่าของพื้นที่พีค BP บนโครมาโตแกรม) ที่ได้จากการฉีดสารละลายสองครั้งลงในโครมาโตกราฟี ผลการควบคุมถือว่าน่าพอใจหากช่วงของสัญญาณเอาท์พุตซึ่งอ้างถึงค่าเฉลี่ยเลขคณิตไม่เกิน 8%

การควบคุมความถูกต้องของการสร้างลักษณะการสอบเทียบ

การควบคุมจะดำเนินการในการสอบเทียบแต่ละครั้ง ผลการควบคุมได้รับการยอมรับว่าน่าพอใจหากตรงตามเงื่อนไขสำหรับ "โซลูชันการสอบเทียบแต่ละครั้ง"

ที่ไหน sj- ค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค BP สำหรับโซลูชันการสอบเทียบที่ y, c.u.; ส)- ค่าของพื้นที่พีคที่สอดคล้องกับลักษณะการสอบเทียบของความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายสอบเทียบ y "c.u.

การควบคุมความเสถียรของลักษณะการสอบเทียบ

การควบคุมจะดำเนินการทุกวันก่อนที่จะเริ่มทำงานกับตัวอย่างที่วิเคราะห์โดยใช้สารละลายควบคุม ซึ่งใช้เป็นสารละลายสอบเทียบที่มีความเข้มข้นของมวล BP ที่สอดคล้องกับเนื้อหาที่อนุญาตในวัตถุที่วิเคราะห์

ผลการควบคุมถือว่าน่าพอใจหากตรงตามเงื่อนไข

โดยที่ C ki - ค่าความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายควบคุม พบโดยลักษณะการสอบเทียบสำหรับค่าเฉลี่ยของพื้นที่พีค µg/cm 3 ; ด้วย ถึง - ค่าความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายควบคุมตามตาราง 2.

การควบคุมการบรรจบกันของผลการกำหนด

การควบคุมจะดำเนินการในการวิเคราะห์แต่ละครั้ง (การวัด) ผลลัพธ์ของการควบคุมถือว่าน่าพอใจ ถ้าช่วงของผลลัพธ์ของการกำหนด อ้างอิงถึงค่าเฉลี่ยเลขคณิต (ผลการวิเคราะห์) ไม่เกิน 10%

การควบคุมข้อผิดพลาดด้วยวิธีการเสริม

ดำเนินการควบคุม:

• ก) ก่อนเริ่มแอปพลิเคชัน MVI นี้ - โดยไม่ล้มเหลว
• b) เมื่อผลลัพธ์ที่น่าสงสัยของการกำหนดสัดส่วนมวลของ BP ปรากฏขึ้น
• c) ตามแผนการควบคุมภายในห้องปฏิบัติการ
• d) ตามคำร้องขอขององค์กรที่ควบคุมกิจกรรมของห้องปฏิบัติการ

สารเติมแต่งถูกสร้างขึ้นบนพื้นฐานของสารละลายสอบเทียบ มูลค่าเพิ่ม (ด,มก./กก.) ถูกเลือกเพื่อให้สัดส่วนมวลของ BP ในตัวอย่างเพิ่มขึ้น 1.5-2.5 เท่า การคำนวณจะดำเนินการตามสูตร

ที่ไหน ซีดี- ความเข้มข้นมวลของ BP ในสารละลายสอบเทียบ µg/cm 3 ; โว- ปริมาตรของสารละลายสอบเทียบ BP ที่ใส่เข้าไปในตัวอย่าง cm3; เอ็ม fw- น้ำหนักเท่ากันของตัวอย่างที่นำมาวิเคราะห์ g.

สารเติมแต่งนี้ถูกนำมาใช้ในสารสกัดเบื้องต้นของเมล็ดพืชหรือตัวอย่างดินในรูปแบบของสารละลายสอบเทียบที่เตรียมตามตาราง 2. สารเติมแต่งถูกนำมาใช้ในสารสกัดหลักของผลิตภัณฑ์ที่รมควันในรูปแบบของสารละลายที่มีความเข้มข้นใกล้เคียงกันในเฮกเซน ในการทำเช่นนี้ GRM ขององค์ประกอบ BP ในเฮกเซน (ดูด้านบน) จะถูกเจือจาง (โดยคำนึงถึงการแก้ไขสำหรับค่าความเข้มข้นที่ผ่านการรับรอง) ตามขั้นตอนในการเตรียมสารละลายสำหรับการสอบเทียบ (ดูด้านบน) โดยใช้เฮกเซนเป็นตัวทำละลายและ ได้สารละลายที่มีความเข้มข้นที่ต้องการ เมื่อใช้องค์ประกอบ GSO ของ BP ในอะซีโตไนไทรล์หลังจากการระเหยของตัวทำละลาย สารตกค้างที่แห้งจะถูกละลายซ้ำในเฮกเซนและเจือจางด้วยเฮกเซน ดังที่อธิบายไว้ข้างต้น

การวิเคราะห์ตัวอย่างสองตัวอย่างที่มีเนื้อหาตามธรรมชาติของ BP และสองตัวอย่างด้วยการเพิ่ม BP จะดำเนินการภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน ผลการควบคุมถือว่าน่าพอใจหากตรงตามเงื่อนไข

ที่ไหน W D- เศษส่วนมวลของความดันโลหิตในตัวอย่างที่มีสารเติมแต่ง มก./กก. W- เศษส่วนมวลของความดันโลหิตในตัวอย่างที่ไม่มีสารเติมแต่ง mg/kg ( W Dและ ว-ค่าเฉลี่ยของเศษส่วนมวลสำหรับสองตัวอย่างโดยมีผลบวกของการควบคุมการบรรจบกัน)

ภาพประกอบของการประยุกต์ใช้เทคนิคนี้ในเชิงนิเวศน์เชิงปฏิบัติสามารถใช้เป็นโครมาโตแกรมและกราฟสอบเทียบสำหรับการกำหนดเบนโซ (a)ไพรีนในผลิตภัณฑ์อาหาร (รูปที่ 11.15 และ 11.16)

ผลของการควบคุมข้อผิดพลาดในการกำหนดเบนโซ (เอ)ไพรีนในวัตถุโดยวิธีการเติมด้วยการตรวจจับฟลูออไรเมตริก 375 Ex/405 Et (ตัวแปร 3)

ระดับของสารเติมแต่งสอดคล้องกับ 0.5 ของเนื้อหาที่อนุญาตของเบนซาไพรีน (0.0005 มก./กก. - เมล็ดพืชและผลิตภัณฑ์รมควัน, 0.01 มก./กก. - ดิน)

ข้าว. 11.15.

การสำเร็จการศึกษาสำหรับส่วนประกอบ: BaP ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์: 0.999667 การตอบสนอง: พื้นที่

อ้างอิงช่อง 365 Ex/405 Em

สูตร Y = Ki X

ค่า 100 ( W D - W-D)/ดคือ 10 และ 16% สำหรับตัวอย่างที่ 1 และ 2 ตามลำดับ สารประกอบเป้าหมายในตัวอย่างต้นทาง แป้งสาลีมีจำนวน 0.0009 กก./กก.

ตัวอย่างที่ 1 - 0.00064 มก./กก. ตัวอย่างที่ 2 - 0.00067 มก./กก.

• ในกรณีทั่วไป ลักษณะเฉพาะของการสอบเทียบจะมีรูปแบบ S = AC + B โดยที่ S คือพื้นที่พีค, c.u.; C คือความเข้มข้นมวลของสารก่อมลพิษ µg/cm3; A และ B เป็นสัมประสิทธิ์